某猪场猪伪狂犬病病毒与猪瘟病毒混合感染的诊断.pdf

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1、动物医学进展。2014，35(6)：171—174ProgressinVeterinaryMedicine某猪场猪伪狂犬病病毒与猪瘟病毒混合感染的诊断吴忆春(滨州职业学院生物工程学院，山东滨州256603)摘要：山东某猪场发病猪数头，经症状观察与临床剖检，结合当地流行病学调查及该猪场免疫情况，初步诊断为猪伪狂犬病病毒(Pseudorabiesvirus，PRV)与猪瘟病毒(Classica1swinefevervirus，CSFV)混合感染。因此采集患病猪只的病变组织，进行实验室诊断。将病变组织按常规方法处理后，提取总DNA与RNA，经PCR扩增，获得PRV阳性目的片段约2

2、17bp；经RT-PCR扩增，扩增出CSFV阳性片段约510bp；证明该猪场为PRV与CSFV混合感染。随后应用BHK一21细胞与PK-15细胞分别进行PRV与CSFV的分离培养，并盲传3代。结果显示，经BHK一21细胞传代培养至F3代，可见典型的PRV细胞病变，经PCR进一步鉴定为PRV，毒力测定其TCID5。为10·鹊TCID5。／o．1mL；PK-15细胞传代培养至F3代，经PCR鉴定为CSFV阳性。综合以上结果，最终确诊该猪场为CSFV与PRV混合感染。随后采用紧急接种的预防方法，并进行患病猪只的部分淘汰，最终获得了满意的防控效果，降低了经济损失。关键词：伪狂犬病病

3、毒；猪瘟病毒；混合感染；诊断中图分类号：$859．795；$858．28文献标识码：B文章编号：1007—5038(2014)06—0171—04伪狂犬病(Pseudorabies，PR)是由伪狂犬病病慢，甚至出现僵猪；同时，该场怀孕母猪呈现流产、早毒(PRV)引起猪、牛、羊等多种动物感染的一种以发产、产死胎等现象。该猪场发病初期，经多种抗生素热、奇痒(除猪外)及脑脊髓炎为主要特征的急性传与抗病毒药物治疗无效。后经本实验室剖检，可见染病。猪是PRV的自然宿主，同时也是携带者与传病死猪肝脏肿大、出血；脾脏出血，个别猪脾脏边缘播者，不同日龄的猪感染后可呈现出不同的症状，病出现梗

4、死灶；胃底部有出血点，肠道呈卡他性炎症；死率随日龄增长而降低，但可造成育肥猪增重缓慢、喉头水肿；肺部出血、水肿；心包少量积液，但无出血料肉比显著增高，母猪屡配不孕、流产、死胎及木乃点；全身淋巴结肿大、出血。综合以上症状及剖检变伊胎等现象，给养殖业带来较大的损失_1]。世界动化，结合该猪场免疫情况，初步判断为PRV继发物卫生组织(OIE)将该病列为必须报告的传染病，CSFV混合感染。针对该病情，首先进行全场带猪我国农业部将该病列为二类动物疫病。近几年来，消毒，隔离并淘汰部分病猪；随后进行全群紧急接随着畜牧业的集约化、规模化的不断扩大，该病在我种，怀孕后期的母猪不免疫，新生仔猪

5、出生后立即注国不同地区呈不断扩散与蔓延的趋势]。射CSFV活疫苗，2h后开始哺乳，全场20d以上的猪瘟(Classicalswinefever，CSF)是由猪瘟病毒猪，紧急接种CSFV活疫苗，仔猪出生后7d注射(CSFV)引起的一种急性、热性、接触性传染病，病死PRV双基因缺失活疫苗。经采取防控措施，该猪场率极高，给我国乃至世界养猪业的发展带来严重危的疫情得以有效控制，从而为本地区该类疫病的防害。随着CSF疫苗的研发与广泛使用，CSF在一定控提供了参考。程度上得到了控制，无大规模暴发的疫情出现，但是1材料与方法仍呈散发与继发性流行，不断困扰着我国养猪业的发展[3]。2013

6、年7月～8月，在山东省某猪场，未1．1材料断奶仔猪与育肥猪相继出现了体温升高、顽固性下1．1．1实验动物选择体重为2kg～2．5kg的大痢、呼吸困难、呕吐、肌肉震颤、转圈等临诊症状，触耳白家兔，试验前3d，每日上午与下午分别测量体诊个别猪只腹股沟淋巴结明显肿大，仔猪病死率可温1次，并采血分离血清，应用酶联免疫吸附法测定达6O，育肥猪病死率可达309／6，存活猪只生长缓其OD值；选取体温正常、温度差波动较小、PRV与收稿日期：2013—12—18作者简介：吴忆春(1976一)，女，安微安庆人，硕士研究生，讲师，主要从事微生物学和生物制品学研究。172动物医学进展2014年第3

7、5卷第6期(总第252期)CSFV血清学阴性的家兔，饲养于山东绿都生物科并盲传3代。②PRVTCID。的测定：将上述病毒分技有限公司动物房，室温23℃±2。C，供给全价饲离培养液进行1O～1O。倍比稀释，加入长至单层料，自由采食与饮水。的BHK一21细胞96孔细胞培养板中，100j工L／孔，1．1．2细胞PK一15与BHK一21细胞由本实验室8孔／稀释度，连续培养5d～7d，观察并记录细胞病保存。变，依据Reed—Muench法计算PRV的TCIDs。。③1．1．3试剂细胞培养基DMEM，GIBCO公司产PRV的鉴