微粒子化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体的性能评价.pdf

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1、370中日友好医院学报2012年第26卷第6期JoumolofChina-Japann据,~hip舶spital，2012Dec，Vof．26，No．6微粒子化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体的性能评价李囡，金燕萍，阎超(中日友好医院检验科，北京100029)目前，大多医院将梅毒螺旋体抗体检测作为术前常规度开始为阴性(S／Co0．85)；TPPA法从1：2稀释度开始为阴检查和产前筛查项目，这使得传统的血清学手工实验难以性。CMIA法灵敏度高于TPPA法。(3)经重复性试验，满足日益增长的样本量需要。目前已有多种全自动免疫分CMIA法在3个不同水平测定值的批间和批内变异

2、系数均析仪具备大量检测梅毒螺旋体抗体的能力．本文着重对小于10％(表2)。(4)根据公式计算，携带污染率=(0．093—Architecti2000SR全自动化学发光微粒子免疫分析仪检测0．09)／(29．78—0．09)x100％=0．01％(表3)。梅毒螺旋体特异性抗体的灵敏度、精密度、携带污染率等4讨论方面进行评价。目前，临床实验室诊断梅毒螺旋体感染的主要方法是1材料血清学实验，包括对梅毒螺旋体非特异性抗体和特异性抗1．1标本来源体的检测。常用的检测非特异性抗体的实验包括甲苯胺红收集130例血清为2011年10月～2012年8月间我不加热血清试验(TRUST)、

3、快速血浆反应素环状卡片实验院门诊和住院患者，均行TPPA和CMIA检测。(RPR)，检测特异性抗体的实验包括明胶颗粒凝集实验1．2仪器和试剂(TPPA)、血凝实验(TPHA)和酶联免疫吸附实验(TP—梅毒螺旋体特异性抗体明胶颗粒凝集试验(TPPA)试ELISA)t”。由于前2种方法检测的不是梅毒螺旋体的特异剂盒(由日本富士株氏会社提供)：Architecti2000SR型微性抗体，有较高的假阳性率和假阴性率，因此仅作为初筛粒子化学发光免疫分析仪(CMIA)及其配套SyphilisTP诊实验。凝集法作为临床确证实验又有手工操作较为繁琐、断试剂(由美国雅培提供)。肉眼判断

4、结果受人为因素干扰等缺陷。TP—ELASA在大2方法样本量操作时又难于保证加样及反应时间的一致。(1)明胶颗粒凝集法检测：严格按照TPPA试剂盒说雅培Architecti2000SR全自动化学发光微粒子免疫明书对130例临床血清进行梅毒螺旋体特异性抗体检测。分析(CMIA)是以梅毒螺旋体重组抗原YpN15、pN17和仪器法检测：用i2000重复检测130例临床样本，S／CoTpN47包被磁性微粒，待检血清中如有相应的抗体。则可值≥1为阳性，<1为阴性。(2)比较仪器法与TPPA的灵敏与磁微粒上的抗原结合，再加入吖啶酯标记的二抗以及激度：将弱阳性混合血清进行4个稀释度的

5、倍比稀释，对每发液和预激发液。通过激发光的强度对血清中的特异性抗个稀释度的血清分别用CMIA法和TPPA试剂盒测定1O次，比较两者的灵敏度。(3)精密度：将阳性混合血清制成表12种方法检测结果比较3个稀释水平的样本，作为高值、中值、和低值血清。3个水平的样本每天测定3次，(每次测定间隔不得少于2h)，每次测定均做3份，连续测定3d。对所得数据计算批间、日间及总变异。(4)携带污染率：选取强阳性血清为高值标本，均分为3管，标注为H1、H2、H3，选取阴性血清为低值标本，均分为3管，标注为L1、IJ2、L3，将低高值血清相互交叉排放，连续测定6管，利用以下公式计算携带污染

6、率，携带污染率：(Ll—L3)／(H3一L3)~100％。(5)用SPSS11．0统批内批间计软件进行分析。2种方法检测结果的差异用检验，P0．05)。不一致样本3例(表1)。以TPPA法检测结果为标准，CMIA的敏感度为99％(101／102)，特异性为高值标本(S／Co)低值标本(S／Co)93％(26／28)。(2)CMIA法检测弱阳性混合血清从1：4稀释H1H2H3

7、L1L2L329．9129．729．780．0930．10．09收稿日期：2012—09—11修回El期：2012—11-08中日友好医院学报2012年第26卷第6期Jo“rnalD厂Chn口一却r仇Frien^Ho印ita!，2012Dec，Vo1．26，No．6371体进行相对定量。5参考文献以上实验证实，CMIA法具有很好的重复性和极低的[1】SaralY，DilekAR，DilekN，eta1．Serologicdiagnosisof携带污染率。与目前梅毒螺旋体特异性抗体的临床确证实syphilis：c0mparisonofdifferent