通阳活血方对兔缺血再灌注窦房结细胞骨架微管蛋白β-tubulin的影响.pdf

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1、2014年11月第21卷第11期中国中’医药信息杂志·45·●实验研究●通阳活血方对兔缺血再灌注窦房结细胞骨架微管蛋白I3一tubulin的影响彭杰，刘如秀，刘宇中国中医科学院广安门医院，北京100053摘要：目的观察通阳活血方对模拟缺血再灌注损伤兔窦房结细胞骨架微管蛋白13一tubulin的影响，探讨其治疗病态窦房结综合征的机制。方法取新生乳兔窦房结细胞，以缺氧缺糖模拟缺血，以恢复氧和糖的供应模拟再灌注造成窦房结细胞损伤模型，将细胞分为空白组、模型组和通阳活血方高、中、低剂量组。治疗组给予通阳活血方相应浓度药物，空白组与模型组给予等容积培养基

2、，采用酶标仪、激光共聚焦显微镜观察各组窦房结细胞活力、细胞骨架微管蛋白13一tubulin形态变化。结果模型组存活细胞量较空白组明显减少(尸<0．01)；B—tubulin裂解明显。通阳活血方高、中、低剂量组存活细胞量明显高于模型组(P<0．05)，—tubulin结构较模型组明显完整。结论通阳活血方可抑制模拟缺血再灌注引起的兔窦房结细胞损伤，其治疗病态窦房结综合征的机制可能与保护窦房结细胞活力及细胞骨架微管蛋白B-tubulin形态结构有关。关键词：通阳活血方；窦房结细胞：缺血再灌注：细胞骨架：B—tubulin蛋白：兔DO!：10．3969

3、／j．issn．1005—5304．2014．11．014中图分类号：R285．5文献标识码：A文章编号：1005—5304(2014)l1—0045—03EffectofTongyangHuoxueRecipeonCytoskeletonProteinp-tubulinofIschemiaReperfusionInjuredSinoatrialNodeCellinRabbitsPENGJie，LIURu—xiu，LIUYu(GuanganmenHospital,ChinaAcademyofChineseMedicalSciences,BeUi

4、ng100053，China)．Abstract：0bjectiveToobservetheeffectsofTongyangHuoxueRecipeoncytoskeletonprotein13-tubulinofischemiareperfusioninjuredsinoatrialnodecellinrabbits；Todiscussitsmechanismsinthetreatmentofsicksinussyndrome．MethodsSinoatrialnodeceilswereobtainedfromnewbornrabbit．O

5、xygenandglucoseweredeprivedtosimulateischemiaandwererestoredtosimulatereperfusion．Ceilsweredividedinto5groups．TongyangHuoxueRecipehigh一，medium一，lowdosegroupsweregivencorrespondingmedicine(finalconcentrationsof100，20，10~g／mL)．Thenormalgroupandmodelgroupweregivenequalvolumeofc

6、ulturemedium．EnzymemarkinstrumentandlaserscanningconfocalmicroscopywereusedtoobservethesinoatrialnodecellactivityandcytoskeletonproteinD—tubulinofeachgroup．ResultsLivingceUsofmodelgroupdecreasedsignificantlycomparedwithnormalgroup(P<0．01)，andcytoskeletonproteinp—tubulincleav

7、agesignificantly．LivingcellsofTongyangHuoxueRecipehigh，mediumandlowdosegroupweresignificantlyhigherthanthoseinthemode1group(P<0．o5)，and13一tubulinstructureremainedmorecompletethanthemodelgroup．ConclusionTongyangHuoxueRecipecaninhibittheinjuryinducedbyischemiareperfusionofsino

8、atrialnodecells；thepossiblemechanismofTongyangHuoxueRecipeintreatingsicksin