尿碘比色法量检测试剂盒产品说明书(中文版).doc

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1、尿碘比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途尿碘比色法定量检测试剂是一种旨在通过过硫酸铵热消解预处理后,运用砷铈催化还原方法,测定样品中无色还原产物,即采用比色法测算尿碘含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良桑德尔-科尔索夫(Sandell–Kolthoff)方法、成功实验证明的。适用于各种尿液样品尿碘含量的检测。产品即到即用,操作简捷,性能稳定,检测敏感。技术背景碘在甲状腺生理学方面起着主要作用,碘化合物是正常脊锥动物生长和发育所必需的。尿碘(urinaryiodine)检测成为饮食碘

2、摄入监测的最常用的工具,从而评价人群碘缺乏症(iodinedeficiencydisorders;IDD)的状况。尿碘的检测方法主要运用桑德尔-科尔索夫反应(Sandell–Kolthoffreaction),即首先进行过硫酸铵(ammoniumpersulfate)热消解预处理后,在亚砷酸(arseniousacid)还原剂的存在下,通过碘催化黄色的硫酸铈铵(cericammoniumsulfate)还原为无色的三价铈(cerousform)的反应,在分光光度仪(405nm波长)下出现吸收峰值的降低变

3、化,来定量测定样品中尿碘的含量。产品内容消解液(ReagentA)5毫升还原液(ReagentB)5毫升显色液(ReagentC)3毫升标准液(ReagentD)500微升稀释液(ReagentE)500微升产品说明书1份保存方式保存在—20℃冰箱里;试剂具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于标准样品配制和样品保存的容器(微型)台式离心机:用于样品制备干式恒温仪:用于反应孵育比色皿或96孔板:用于比色的容器分光光度仪或酶标仪:用于比色分析实验步骤一、标准样品配制1.准备好待

4、测样品,置于冰槽里备用2.设定好分光光度仪:波长405nm,并置零3.准备好5个1.5毫升离心管,标记为1至5号管4.分别加入50微升稀释液(ReagentE)到2至5号管5.移取100微升标准液(ReagentD)到1号管,混匀6.小心移取50微升1号管标准液(ReagentD)到2号管,混匀7.小心移取50微升2号管稀释的标准液(ReagentD)到3号管,混匀8.小心移取50微升3号管稀释的标准液(ReagentD)到4号管,混匀9.将1至5号管放进冰槽里备用,避免光照;标准管浓度见下表管号稀释液

5、(ReagentE)标准液(ReagentD)标准尿碘浓度1――100微升300微克/升250微升50微升1号管150微克/升350微升50微升2号管75微克/升450微升50微升3号管37.5微克/升550微升00二、样品测定1.分别移取50微升新鲜的待测样品或上述配制的标准液(ReagentD)到1.5毫升离心管2.分别加入100微升消解液(ReagentA),混匀3.放进100℃干式恒温仪孵育60分钟4.置于室温下冷却15分钟,或直至室温均衡5.分别移取50微升上述预处理样品到新的比色皿或96孔板

6、6.分别加入100微升还原液(ReagentB),混匀7.分别加入50微升显色液(ReagentC),混匀8.放进25℃恒温培养箱孵育30分钟,避免光照9.即刻放进分光光度仪或酶标仪检测(405nm波长):获得吸光读数10.构建标准曲线:纵座标(Y轴)为吸光读数;横座标(X轴)为标准尿碘浓度(微克/升)11.根据标准曲线获得样品对应尿碘浓度12.计算样品实际尿碘浓度(微克/升)【根据标准曲线获得样品对应尿碘浓度(微克/升)X样品稀释倍数】注意事项1.本产品为50次操作,包括标准测定2.操作时,须戴手套3

7、.建议收集新鲜尿液;保存在-70℃冰箱里4.试剂具有腐蚀性,注意操作安全5.样品中避免使用硫氰酸钾(potassiumthiocyanate;大于等于0.1毫摩尔/升)、抗坏血酸(ascorbicacid;大于等于4毫摩尔/升)、硫酸亚铁铵(ferrousammoniumsulfate;大于等于16毫摩尔/升)等,否则干扰检测1.本产品测定理想范围在0至300微克/升(0至2.36微摩尔/升)2.孵育时,避免光照3.如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度;注意在计算实际浓度时,不要忘记乘上样品稀释

8、倍数4.吸光读数越低,碘含量越高5.国际上规定:尿碘水平在0至0.15微摩尔/升(0至19微克/升)为严重缺乏;0.16至0.38微摩尔/升(20至49微克/升)为中度缺乏;0.40至0.78微摩尔/升(50至99微克/升)为轻度缺乏;0.79至1.56微摩尔/升(100至199微克/升)为正常;1.57至2.36微摩尔/升(200至299微克/升)为偏高;大于2.37微摩尔/升(300微克/升)为过高6.本公司提供系列医学生化检测试剂产品

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