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《微柱凝胶法在新生儿溶血病IgG抗体效价检测中的应用及方法学探讨.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、·1154·实用医技杂志2007年3月第14卷第9期(旬刊)JPMT,March.2007,Vol.14,No.9(IssuedEveryTenDays)微柱凝胶法在新生儿溶血病IgG抗体效价检测中的应用及方法学探讨周安祥,傅凤琴,吴燕(西安铁路中心医院,陕西西安710054)[摘要]目的:探讨微柱凝胶法在新生儿溶血病实验诊断中测定孕妇血清中IgG抗体效价的可行性及方法学。方法:孕妇血清用2-Me处理做倍量稀释后,采用微柱凝胶法测定IgG抗体效价。同时与试管法进行对照比较。结果:用微柱凝胶法和试管法同时检测孕妇血清中
2、的IgG抗体效价,其结果符合率为84.5%(93/110),其中IgG抗体效价<64时符合率为85,4%(70/82),IgG抗体效价≥64时符合率为82.1%(23/28)。两种方法检测孕妇血清IgG抗体效价结果差异无显著性(P>0.05)。结论:应用微柱凝胶法测定孕妇血清IgG抗体效价,能够使实验方法简单化、自动化,使实验操作标准化,判读结果直观、与试管法相比减少了肉眼判读结果时的人为误差。方法灵敏度高,结果准确可靠。[关键词]微柱凝胶法;IgG抗体效价;方法学[中图分类号]R722.18[文献标识码]B[文章编
3、号]167125098(2007)09211542021材料与方法2结果1.1检测对象2005年8月至2006年9月在本院门诊围产2.1两种方法检测对2005年8月至2006年9月在我院保健及住院待产的孕妇110例,年龄在23周岁～35周岁,孕围产保健及住院待产的110例孕妇血清IgG抗体效价用微柱妇ABO血型均为O型,且丈夫血型为A型、B型或AB型。凝胶法和试管法同时检测,其检测结果见表1。1.2实验仪器及试剂DiaMed-ID卡式血型配血系统(ID表1110例孕妇血清IgG抗体效价两种方法检测结果(例)-Cent
4、rifuge12SⅡ离心机和ID-Incubator37SⅠ保温孵育器抗体效价微柱胶胶法试管法购自瑞士达亚美公司),达亚美Liss/coobs卡,抗人球蛋白试<164950剂323335(购自上海血液生物医药有限责任公司)。6420181.3检测方法128761.3.1采用微柱凝胶法对受检孕妇血清进行IgG抗体效价25611测定抽取受检孕妇血标本5ml,置37℃水浴10min,离心合计110110分离血清与红细胞。取试管一支,加受检孕妇血清0.2ml及2.2采用微柱凝胶法测得110例孕妇血清IgG抗体效价2-me试剂
5、0.2ml,混合加塞,置37℃水浴30min进行处理,结果与试管法比较,结果符合率为84.5%(93/110),其中IgG以充分破坏血清中的IgM类抗体。另取6支干净试管,置于抗体效价<64时结果符合率为85.4%(70/82)、IgG抗体效试打架上,第一支试管加处理后的血清50μl和盐水350μl价≥64时结果符合率为82.1%(23/28)。两种方法测定所得混匀。第2支至第6支试管分别加入200μl盐水。从第1支结果经统计学处理,微柱凝胶法IgG抗体效价几何均值为试管中吸取200μlul液体加入第2试管中混匀,再
6、从第2支29.7,试管法IgG抗体效价几何均值为28.8。两种方法检测试管中吸取200μl液体加入第3支试管中混匀,依次倍量稀孕妇血清IgG抗体效价结果差异无显著性P>0.05(轶和检释(第1管～第6管稀释倍数依次为1∶16、1∶32、1∶64、1∶验)。128、1∶256、1∶512)。取达亚美Liss/coombs卡(一卡六管)3讨论一张,撕去铝箔,6管中各加父亲1%红细胞悬液50μl。从第微柱凝胶试验是红细胞膜抗原与相应抗体在凝胶介质中1支～第6支试管中各取25μl液体分别加入达亚美Liss/[2]发生的凝集反
7、应,是一种免疫学检测技术。微柱凝胶分中coombs卡的6管中。将加好样的达亚美Liss/coombs卡置于性胶、特异性胶和抗人球蛋白胶,本试验是用抗人球蛋白胶检ID-Incubatre37SⅠ保温孵育器内,孵育15min,将孵育好的测IgG不完全抗体和相应红细胞抗原的反应。本研究应用微Liss/coombs卡置ID-Centrifuge12SⅡ离心机内离心15min。柱凝胶法在HDN实验诊断中检测孕妇血清中IgG抗体效价,判读结果:出现1+的最高管稀释度的倒数即为IgG抗体效其检测结果与试管法检测结果一致。但试管法测
8、定血清中价。IgG抗体效价时操作程序复杂,需要对红细胞经过反复洗涤1.3.2采用试管法对同一受检孕妇血清进行IgG抗体效价后加入抗人球蛋白试剂观察凝集现象,洗涤费时,结果判断时测定取干净试管8支置于试管架上,分别加入200μl盐人为因素干扰较大。而微柱凝胶法是通过调节凝胶的浓度来水,第1支试管加入上述处理过的血清200μl混匀,从第1支控制凝胶
