酶联免疫吸附法检测饲料中赭曲霉毒素A.pdf

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1、第52卷第14期湖北农业科学V0I-52No．142013年7月HubeiAgriculturalSciencesJu1．，2013酶联免疫吸附法检测饲料中赭曲霉毒素A周康，陶光灿，李勇2何丽霞，彭鸽，于君(1．贵阳市农产品质量安全监督检验测试中心，贵阳550081；2．北京勤邦生物技术有限公司，北京102206)摘要：将赭曲霉毒素A进行化学修饰，制备赭曲霉毒素A半抗原及人工抗原，免疫动物，并通过单克隆抗体技术制备了赭曲霉毒素A的单克隆抗体及酶标记抗体．建立赭曲霉毒素A的酶联免疫吸附法结果表明，该法灵敏度为1g／L，在20g／和40g／kg的加标水平下

2、，赭曲霉毒素A在饲料(浓缩料、配合料和原料)的回收率为81．8％96．1％，变异系数为8．3％12．2％。本法适用于饲料样本中赭曲霉毒素A的检测。关键词：酶联免疫吸附法；单克隆抗体；赭曲霉毒素A；饲料中图分类号：$816．32文献标识码：A文章编号：0439—8114(2013)14—3406—03DeterminationofOchratoxinAResidueinFeedbyELISAZHOUKang，TAOGuang-canz,LIYong2，HELi-xia2，PENGGE2,YUJu#(1．AculturaProductsAnalysis＆T

3、estingCenterofGuiYang，GuiYang550081，China2．BeijingKwinbonBiotechnologyCo．，Ltd，Beijing，102206)Abstract：OchratoxinAwaschemicallymodifiedtoprepareamificiMantigenandhapten，whichwasappliedtoimmunizeanimals．Andmonoclonalantibodyaswellasenzyme—labeledantibodyofochratoxinAwaspreparedbym

4、onoclonalantibodytechnique．Theenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)ofochratoxinAwasestablished．Theresultsshowedthatthesen—sitivityofthemethodwas1~g／L；undertheaddinglevelof20g／kgand40昏／kg，therecoveryrateofochratoxinAinfeed(concentratedfeed，mixedfeedandrawfeed)was81．8％~96．1％．Theme

5、thodwasfeasiblefordetectionofochratoxinAinfeedsamples．Keywords：enzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)；monoclonalantibody；ochratoxinA；feed赭曲霉毒素A(OchratoxinA)是一种真菌毒素．原抗体免疫化学反应为基础进行测定的方法．具有主要由产毒曲霉菌和青霉菌产生．常污染食品和饲灵敏度高、快速简便等优点_7l本试验建立了基于料[1，。赭曲霉毒素A能引起动物急性和慢性中毒．单克隆抗体的ELISA法检测赭曲霉毒素A．其灵敏是

6、强致癌物．对肾脏造成不可逆的致死毒害．还可度高、快速简便，适用于饲料中赭曲霉毒素A的快导致胎儿畸形、流产甚至死亡，其对人类的潜在危速批量检测害备受关注l3l国际癌症研究机构在1993年将其1材料与方法定为人类可能致癌物．赭曲霉毒素A广泛存在于农产品及畜产品中．通过污染食物和饲料直接或间接1．1样品与主要试剂进入人类食物链．因此有必要加强对赭曲霉毒素A饲料(浓缩料、配合料、原料)样品购于贵阳某的检测[5，农贸市场，均质后置于4℃．待测。目前．赭曲霉毒素A的残留分析方法主要有免赭曲霉毒素A标准品．购自中国兽医药品监察疫学检测方法和仪器分析方法．仪器检测方法

7、主要所；牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、辣根过通过其荧光特性进行高灵敏度检测．其样本处理过氧化物酶(HRP)．购自Sigma公司；其他常规试剂，程一般较复杂．检测成本较高：免疫分析法是以抗除特别注明外均购自北京化学试剂公司收稿日期：2013—04—30作者简介：周康(1963一)，男，贵卅I贵阳人，高级下程师，主要从事农产品质量安全及检验检测，(电话)13809454621(电子信箱)781540774@qq．COIn；通讯作者，陶光灿(1976一)，男，副研究员，博士，主要从事食品及农产品中营养成分和风险物质快速检测产品开发，(电话)08

8、51—8117001(电子信箱)tgcan@kwinbon．COrn。第14期周康等：酶联免疫