交叉配血(聚凝胺法、微柱凝胶法).ppt

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1、交叉配血（聚凝胺法、微柱凝胶法）临床血液教研室交叉配血交叉配血聚凝胺法：原理：将红细胞和血清放置在低离子介质中孵育，可促进抗体和红细胞膜血型抗原结合，再加入聚凝胺促进红细胞非特异性凝集。离心后加入重悬液(电荷中和)，正常红细胞的凝集解散，而抗体抗原结合引起的红细胞凝集仍然存在。操作步骤：抽取受血者静脉血3～4ml，枸橼酸钠抗凝，以生理盐水洗涤受血者红细胞3次，配成3%红细胞悬液，同样方法处理献血者样本；取洁净小试管2支，1支标记为主侧管，另1支标为次侧管；主侧管内加受血者血清2滴、献血者红细胞悬液1滴；次侧管加献血者血清2滴、受血者红细胞悬液1滴；每管各加LIM溶液0.6ml，混匀，室温孵育1

2、min;每管各加2滴聚凝胺溶液，混合后静置15s;1300g离心15s，倾去上清液；轻轻摇动试管，目测细胞有无凝集，如无凝集，必须重做；加入2滴重新悬浮液，并轻轻转动试管混合，肉眼观察结果，必要时用显微镜观察结果。结果判断：主侧管和次侧管内红细胞凝集在1min散开，则为聚凝胺引起的非特异性凝集，表示受血者和献血者配血相容。如果主侧管和/或次侧管内红细胞凝集不散开，则表明两血不相容，献血者血液不可输注。注意事项：实验结果必须在3分钟内判读在冬天气温较低时，某些病人血清中含有冷凝集素而导致交叉配血假阳性;遇此现象可用37℃-40℃生理盐水洗涤红细胞并置37℃水溶中轻轻摇动，观察结果。LIM:降低溶

3、液的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云，可促进抗体和红细胞膜血型抗原结合。聚凝胺:高价阳离子,中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞间距,促进红细胞非特异性凝集。重悬液:电荷中和。微柱凝胶卡交叉配血试验原理：将受血者、献血者的血清和红细胞，放置主侧和次侧管的反应室中，放置37℃孵育器中孵育，如果血清中存在针对红细胞抗原的血型抗体（lgM型或IgG型）时，红细胞发生凝集，离心后留在微柱的表面，为阳性；如果血清中不含有针对红细胞膜上血型抗原的抗体，红细胞下沉到微柱管的底部，为阴性。操作步骤：按照试剂说明配制好献血者、受血者的红细胞悬液以及分离血清。主侧：25ul受血者血清+50ul1%献血者红细胞，加入

4、主侧管反应室内；次侧：25ul献血者血清+50ul1%受血者红细胞，加入到次侧管反应室内；加样后的试剂卡放置专用孵育器37℃孵育15min；取出试剂卡，放置专用离心机1000g离心9min；取出试剂卡，肉眼观察结果。结果判断：阴性结果：红细胞完全沉降于凝胶管底部。阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中，和（或）出现溶血。