微柱凝胶法交叉配血假阳性结果的分析

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1、微柱凝胶法交叉配血假阳性结果的分析杨爽赵欣欣熊英（黑龙江省齐齐哈尔市红十字中心血站161000）【摘要】目的寻找应用微柱凝胶法进行交义配血岀现假阳性结果的原因。方法用微柱凝胶法对木院需要输血的患者进行交叉配血，阳性者再用凝聚胺法及抗球蛋白配血法交叉配血后进行比较。结果2321例配血中检测出假阳性13例占0,56%0结论微柱凝胶法进行交叉配血灵敏度高，自动化程度高/旦也容易引起假阳性，给交叉配血造成一定的困扰。【关键词】微柱凝胶交叉配血假阳性【中图分类号】R446.ll【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）47-0085-02微柱凝胶法（MGT）是近几

2、年刚传入我国的一种用于抗体筛查、交叉配血的方法，该方法标木用量少，灵敏度高，特异性强，操作简单,结果可较长时间保存［1］。我院检验科用微柱凝胶法对2537例患者进行交叉配血，现将结果分析如下。1材料和方法1.1样木来源所选病例为我院需要输血的2321例患者，供血者为我市血液中心提供的“小辫子”血。1.2试剂微柱凝胶配血卡,专用离心机和孵育箱（瀚通公司）;凝聚胺试剂（珠海贝索牛物技术有限公司）,抗球蛋白试剂（上海血液中心）。1.3方法1.3.1实验原理把献血员的红细胞和患者的血清按一定比例加入微柱凝胶中与其混合，如果是阴性结果则不凝集的红细胞会完全沉到微柱底部。如患者血清

3、中有完全抗体,经37°C孵育后，相对应的红细胞表面抗原会直接与完全抗体结合发牛凝集，离心后这些凝块或颗粒也无法通过微柱凝胶筛即为阳性结果，其阳性的强弱-•般根据微柱中凝集颗粒散布的程度、凝集颗粒的多少，以及微柱上面的凝块来判定。如果有不完全抗体经37°C孵育后，由于微柱凝胶中含有一定量的抗人球蛋白经其搭桥，不完全抗体致敏在献血员的红细胞上，便会形成大的凝集颗粒甚至成块状。1.3.2微柱凝胶法操作步骤标记好cellbind血型卡，主侧:45LL受血者血清加2%供血者红细胞悬液45LL;次侧:45LL供血者血清加2%受血者红细胞悬液45LL,37e孵育15min后专用离心机

4、离心lOmin,观察结果,红细胞沉积在凝胶管底部者为阴性，红细胞聚集在凝胶带上部为阳性。2结果用微柱凝胶法检测出13例次侧管有凝集,用抗球蛋白法和凝聚胺递质法检测均为阴性，后经输注悬浮红细胞后期观察，无不良反应，确定为假阳性。13例假阳性中因为红细胞悬液浓度过高而引起5例，由于纤维蛋白的影响引起3例，因疾病原因引起4例，因冷凝集素引起1例。3讨论作为一种传统试管法的替代技术，微柱凝胶技术的使用愈来愈普及，如果不能正确使用，假阳性和假阴性都会岀现，给安全输血带来隐患。如果供血血细胞处理不好，比如由于血液中心在采血时，“辫子”中的血没有与抗凝剂接触，血液未得到抗凝,血液中存

5、在凝集颗粒，这种颗粒难以通过微柱而出现假阳性。我科通过采取白细胞过滤后的血液配血，克服了这一问题。同样患者血液如果处理不好也会岀现这类问题，如采用血清样标，特别是急诊配血标本,血浆纤维蛋白未完全析出时会出现假阳性结果。在实验中,在急诊配血时如果缩短孵育时间会出现假阴性结果，因此不能一味追求快而牺牲输血安全。也有的实验室拥有不同厂家的微柱凝胶卡，如果混用,也会影响配血结果。新生儿血型鉴定一直是倍受关注的问题，由于其红细胞上抗原性弱，正定型时易漏检抗原，又由于抗体产生的滞后，反定型又容易岀现错误。本室曾遇到儿科医生误将A型病人写成B型,在血型复查吋发现血型错误，但用B型血进

6、行交叉配血时结果呈阴性，于是我们又用了5个B型的献血员和该A型新生儿进行交叉配血'结果也全部呈阴性，更进一步,我们用24例新生儿血清进行相反血型的交叉配血试验（即A、B型新生儿的血清分别用B、A型的红细胞交配），结果有4例呈阴性，经检测此4例新生儿的正反定型不符，而其余的20例正反相符。MGT法是近年来兴起的一项免疫学检测新技术，是生物化学凝胶过滤技术、离心技术与免疫化学抗原抗体反应相结合的产物，其原理是通过调节凝胶的浓度来控制凝胶间隙的大小，只允许游离的红细胞通过，从而便可将游离红细胞与聚集的红细胞分离，再通过离心作用，若红细胞沉积在凝胶管底部,表明红细胞未发生凝集（

7、是阴性反应），若红细胞聚集在凝胶带的上部，则表明红细胞发生凝集（是阳性反应）。MGT法省略了洗涤红细胞及结果确认等繁琐过程，比传统的抗人球蛋白法交叉试验方法简单，易于批量操作⑵,结果明确可靠，反应灵敏，工作程序和结果判定易于标准化、自动化，重复性好，一卡六管、减少标记、避免错误，判读结果不受人为因素的影响，可将其结果输入微机长期保存，以备有疑问或发生医疗纠纷时进行复读和举证。对需要大量反复输血的患者，应用MGT法进行交叉配血既安全又快速简便，而口MGT法所需标本量较少，更适用于新生儿、人面积烧伤等血标本不易抽取的患者，值得在临床输血前的血