pH值及热处理对黄连素抑菌活性的影响.pdf

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1、第二十九卷第六期楚雄师范学院学报Vo1．29NO．62014年6月JOURNALOFCHUXIONGNORMALUNIVERSITYJun．2014pH值及热处理对黄连素抑茵活性的影响王信，罗琴，杨雪梅，谭军，陈菊梅，茶映妍，鲁青(楚雄师范学院化学与生命科学学院，云南楚雄675000)摘要：用滤纸片法测定黄连素的抑菌活性。结果显示黄连素有较宽的抗菌谱，黄连素对以下五种细菌：革兰氏阴性菌大肠杆菌及革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制作用较强，对真菌黑曲霉菌的抑制作用稍弱；黄连素抑菌活性不受热处理的影响

2、，而受pH值影响较大，在pH值为4—8范围内，黄连素抑菌活性较好且稳定。采用液体稀释法，研究了黄连素的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明，黄连素对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为62．5mg／L，对枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度为31．5mg／L，对大肠杆菌的最小抑菌浓度为125mg／L，对黑曲霉的最小抑菌浓度为500mg／L。关键词：黄连素；抑菌活性；温度影响；pH值影响中图分类号：R975文章标识码：A文章编号：1671—7406(2014)06—0053—05医学研究认为，感染疾患的本质是由于细菌异常增殖的结果

3、，其治疗主要选用适当的抑菌或杀菌药物。黄连素，又称小檗碱(Berberine)，是中药黄连、黄柏及三棵针等植物的重要药用成分，具有抗菌、抗炎等作用，是一种天然抗菌剂。⋯材料为小檗科小檗属植物豪猪刺(Berber~soulieana)的根，含有丰富的小蘖碱，现在已经成为除传统中药黄连，黄柏外获得黄连素最重要的植物品种。[23随着对生活水平要求的提高，人们对抗菌材料在生活中应用的研究更加重视。近年来我国抗菌纺织品的研究发展迅速，抗菌纺织品已广泛应用于人们的日常生活中。目前使用的抗菌剂大体可分为无机、有机和天然抗菌

4、剂三大类。天然抗菌剂具有毒性小、环保性好、来源广泛的优点。特别是来源于植物的天然抗菌剂，近年来受到重视。黄连素属于季铵类生物碱，由于具有季铵结构，是一种良好的阳离子型色素的天然植物染料，可用来染色天然纤维织物，得到较为鲜艳的黄色。黄连素既具有染色性又具有抗菌性，由于人们环保安全意识不断提高，开发黄连素为绿色安全植物抗菌染料是值得探索的。l4叫季铵盐类抗菌剂的抗菌机制主要是，通过带正电荷的氮阳离子吸附到带负电荷的细菌细胞表面，干扰膜表面以及细胞质中的酶活性，导致细胞代谢受阻而凋亡。【6而季铵型抗菌染料在织物染色

5、过程中，需要适应较宽的酸碱度及温度变化。在此过程中，氮的正电荷结构有可能发生变化，而影响到黄连素的抗菌性。因而，有必要对黄连素抗菌染料的抗菌性随酸碱度及温度变化进行研究，本文以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和黑曲霉为受试菌株，对黄连素的抑菌活性及抑菌活随酸碱度及温度变化进行研究，为抗菌染料黄连素在染色天然纤维织物上的应用提供实验依据。基金项目：云南省应用基础研究计划资助项目(200667)；楚雄师范学院大学生创新基金资助项目。收稿日期：2014—04—02作者简介：王信(1991一)，男，在读本科生。

6、通讯作者：罗琴(1963一)，女，云南姚安人，彝族，副教授，研究方向：分子光谱及天然有机物。·53·楚雄师范学院学报2014年第6期楚雄师范学院学报2014年第6期1．实验部分1．1试剂与材料三棵针：采自云南楚雄紫溪山，取其根部洗净干燥粉碎过60目筛备用。菌种：金黄葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、黑曲霉(楚雄师范学院化学与生命科学实验室提供)。试剂：无水乙醇、盐酸、氢氧化钠、葡萄糖等均为分析纯。牛肉膏、蛋白胨、琼脂为生化试剂。1．2仪器UV一2401紫外分光光度计(日本岛津公司)；PHS一3CW数字精密酸度

7、计(上海鹏顺科技仪器有限公司)；CP224C电子天平(奥豪斯)；SW—CJ一2F超净工作台(苏州安泰公司)；DHP120恒温培养箱(上海实验仪器厂)；LDZM一60KCS智能型不锈钢立式灭菌器(上海申安医疗器械厂)；HH一2型恒温水浴锅(常州国华电器有限公司)；SHZ一3(111)型循环水多用真空泵(常州国华电器有限公司)；XRC一1显微熔点仪(北京泰克仪器有限公司)。1．3实验方法1．3．1黄连素的提取称取三棵针粉100g，用适量石灰乳浸泡24h后过滤，滤液加入食盐水搅拌，加入石灰乳调pH值为8—9，使黄连

8、素在盐水溶液中沉淀析出，过滤沉淀用蒸馏水洗涤，重结晶后在8O℃干燥，得黄连素晶体。l9用10％乙醇水溶液超声溶解配制成500mg／L的黄连素溶液，4~C保存备用。用时二倍逐级稀释，并调节黄连素溶液到相应pH值，或者在相应温度条件下进行处理。1．3．2滤纸片法测定黄连素抗菌活性¨则将活化培养好的不同菌种各0．2mL菌悬液加至冷却的相应培养基平板中，涂布均匀。将灭菌后直径6mm滤纸片浸入配制好的黄连素溶