基质辅助激光解吸-电离质谱在糖复合物分析中的应用进展.pdf

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1、解放军药学学报第19卷第5期基质辅助激光解吸-电离质谱在糖复合物分析中的应用进展任凤霞·363·文章编号：1008-992（62003）05-0363-05中图分类号：R917文献标识码：A基质辅助激光解吸-电离质谱在糖复合物分析中的应用进展任凤霞!，赵毅民（中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所北京100850）摘要：目的介绍基质辅助激光解吸/电离质谱在糖复合物分析中的应用，为糖复合物的分析提供参考。方法以国外大量有代表性的文献为基础，进行分析、整理和归纳。结果综述了基质辅助激光解吸/电离质谱在分析糖复合物时，常选用的基质，以及在不同类型糖

2、复合物分析中的应用。基质辅助激光解吸/电离质谱在进行糖复合物分析时，选用合适的基质，可以直接确定糖复合物的分子量，避免了样品的衍生化。结合外源糖苷酶的降解，可以确定糖基连接方式和结构异构，并能对糖复合物进行定量。结论基质辅助激光解吸/电离质谱是一种快速、便捷的分析糖复合物的分析方法，已被广泛的用于糖复合物的结构分析。关键词：基质辅助激光解吸-电离质谱；基质；糖复合物；分析基质辅助激光解吸-电离质谱（MALDI-MS）是一种快速、形态、样品与基质比率对谱图质量都有影响。结晶越小，谱便捷的糖复合物的分析方法，已被广泛的用于糖复合物的结图质量越好。基质

3、与样品的分子个数比以104~105为宜［1］。构分析。MALDI-MS分析糖复合物时，选用合适的基质可以!.!用于中性糖复合物分析的基质2，5-二羟基苯甲酸（2，得到糖复合物的分子量和糖的序列信息。糖复合物、蛋白质5-DHB）由于可以与大多数中性糖形成适宜的晶形，因此是中和核酸同属于生物大分子。虽然对糖复合物的研究已有100性糖分析时应用最广泛的基质［2］。其它的二羟基苯甲酸异多年的历史，但是其研究现状却远落后于蛋白质和核酸。这构体对糖分析时产生的信号都较弱，Krause等［3］发现，2，5-是由于单糖是多羟基的醛或酮，在进行糖连接时由于连接位D

4、HB在MALDI-MS中获得较好信号的主要原因是邻位羟基点和苷键构型的不同，可以形成极其复杂的结构，使其结构的存在。L-阿拉伯糖和苯肼反应得到的产物Arabinosazone与解析有很大难度。其中糖复合物分子量测定便是难点之一。样品混合时可以使样品分子高度分散在基质微晶中，可以得质谱的发展，尤其是80年代后期基质辅助激光解吸-电离到很好的质谱信号［4］。咔啉类化合物和被分析物混合后"-质谱（MALDI-MS）的发展使测定分子量超过10000Da的大分由于在样品表面形成高度均一化的晶体也是一类很好的基子成为可能。MALDI-MS是将被分析物的溶液和

5、某种基质溶质。但是咔啉类化合物更多的产生［M+H］+离子，对一些"-液混合，蒸发溶剂，使被分析物与基质成为晶体或半晶体；再低分子量中性多糖还会产生［M-H］-离子，限制了它的使用一定波长的脉冲式激光进行照射从而得到质谱图。基质用［5］。分子必须能有效的吸收激光能量，使基质分子和样品投射到对于分子量很大的样品使用单一基质时，由于基质与被气相并得到电离。MALDI质谱可以使一些难于电离的样品分析物之间的相互作用太强，不能得到理想的质谱信号。混电离，且无明显的碎裂，得到完整的被分析物的分子的电离合基质的出现弥补了这一不足［6］。基质混合的原则是加入产物

6、。MALDI法由于应用的是脉冲式激光，特别适合与飞行同样能嵌入被分析物晶格，但是功能基少的物质。混合基质时间质谱计相配，因而，又称为基质辅助激光解吸-电离飞比以降低晶格能，形成均一晶体为基准。增强离子化强度，行时间质谱（MALDI-TOFMS）。由MALDI所得的质谱图中，减少亚稳离子生成，是混合基质得到良好谱图的主要原因，碎片离子峰少，谱图中有分子离子、准分子离子及样品分子其中增强离子化强度是主要原因［7］。在此原理的指导下，发聚集的多电荷离子。现的混合基质有2-羟基-5-甲氧基苯甲酸［6］、岩藻糖［7］、1-羟本文就近年来MALDI-MS对糖

7、复合物的分析做一综述，基异喹啉（1-HIO）［8］和2，5-DHB的混合物，阿魏酸和岩藻糖主要包括分析时所用基质和在糖复合物分析中的应用。以及5-甲氧基水杨酸、岩藻糖和2，5-DHB的混合物［7］。3-氨基喹啉和#-氰基-4-羟基-苯丙烯酸（4-HCCA）混合使用也是一!糖复合物MALDI-MS分析时所用基质种很好的基质［9］，但是由于还原糖与3-氨基喹啉可以形成选择合适的基质在进行MALDI分析时非常重要。基质Schiff碱，特别是酸性环境中4-HCCA存在的情况下，因此限的选择主要取决于所选用的激光波长，其次是被分析物的性制了它的使用［10］

8、。质。一般认为好的基质必须能吸收紫外光，使之处于电子激在中性糖分析时，一般采用正离子方式，这是由于大部发态，并对基质和被分析物混合物具有