冷冻超薄切片技术中明胶包埋在实体组织样品中的应用-论文.pdf

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1、中国细胞生物学学报ChineseJournalofCellBiology2013，35(9)：1354-1356DOI：10．11844／cjcb．2013．09．0220冷冻超薄切片技术中明胶包埋在实体组织样品中的应用吴轶成陈新宇易静杨洁：．c(上海交通大学医学院生物化学与分子细胞生物学系，上海200025)摘要该丈运用明胶包埋三种不同实体组织，经过冷冻超薄切片技术获得超薄切片，进行透射电子显微镜的观察。结果表明，经明胶包埋后的三种组织块，其超薄切片质量都得到了更好的保证，切片平整且无破损：透射电子显微镜下观察到的超微结构更加完整，有效

2、地保留了组织本身的结构信息。关键词免疫电镜技术；冷冻超薄切片；明胶；生物组织；透射电子显微镜TheApplicationofGelatin--embeddinginUltrathinCryo--sectioningofSolidTissuesWuYicheng，ChenXinyu，YiJing，YangJie(DepartmentofBiochemistryandMolecularCellBiology,ShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicine,Shanghai200025，China)Abst

3、ractThreedifferentbiologicalsolidtissuesareembeddedingelatin，thenultrathincryo—sectionedandobservedbytransmissionelectronmicroscope(TEM)．Theresultsshowthattheembeddedtissuesarebetterthanunembeddedonesinthequalityofultrathincryo-sectionsandtheintegrityofultrastructuresunde

4、rTEM．Keywordsimmunoelectronmicroscopy；ultrathincryo-sectioning；gelatin；biologicaltissue；transmissionelectronmicroscope免疫电镜技术是细胞化学技术和电子显微镜活性，亦避免了其发生移位，对提高后续免疫胶体金技术相结合的一项新技术，是在超微结构水平上定标记的敏感性有着重要的意义f1】。位组织细胞内生物大分子的细胞生物学技术。在免冷冻超薄切片技术中冷冻超薄切片的获得是其疫电镜技术中，冷冻超薄切片技术是较为关键的技中最基本且最关键的

5、一步，切片的质量直接影响后术，其技术特点是生物组织无需经过脱水和包埋的续免疫标记及电镜观察。但由于冷冻超薄切片特殊过程，直接冷冻，在冷冻的状态下进行超薄切片，然的切片环境，要获得一张良好的超薄切片比较困难。后进行免疫标记。该技术大大减少了对生物组织的一般情况下．细胞和结构疏松的小块组织如化学处理，避免了组织和细胞内生物大分子变性，更肺、睾丸等需要经过明胶包埋，以防止切片融化过好地保存了大部分可溶性成分及一些生物大分子的程中细胞和疏松结构的分离，而大部分实体组织的组织块可直接浸泡蔗糖后进行冷冻超薄切片l1。]。但收稿日期：2013-07．1

6、6接受日期：2013．08—26本实验发现，一些非疏松结构的实体组织块，如间隙通讯作者。Tel：021—63846590—776480，E—mail：pollyyj@gmail．cornReceived：July16．20l3Accepted：August26．20l3-08—28较多、具有突起或有空腔的组织，在切片后会产生*Correspondingauthor．Tel：+86．21_63846590-77648O，E-mail：pollyyj@gmail．com间隙增大、突起断裂、空腔内结构撕裂脱落等现象。网络出版时间：20l3—08

7、．2914：45URL：http：／／www．cnki．net&cms／detail／31．2035．O．20130829．1445．006．html因此，本实验利用明胶将这些实体组织进行包埋，发