不同亚型人SMYD3启动子转录活性比较-论文.pdf

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1、第29卷第4期天津科技大学学报、，01．29NO．42014年8月JournalofTianjinUniversityofScience&TechnologyAug．2014DOI：10．13364~．issn．1672—6510．2014．04．002不同亚型人SMYD3启动子转录活性比较刘磊，罗学刚，赵文文，穆爱，辛中帅，张同存(1．工业发酵微生物教育部重点实验室，天津市工业微生物重点实验室，天津科技大学生物工程学院，天津300457；2．中国食品药品检定研究院，北京100050)摘要：利用PCR方法克隆SMYD3两个亚型的启动子区域，并构建其荧光素酶报告质粒．

2、转染COS．7细胞后，利用荧光素酶报告分析技术，对二者启动子的转录活性进行了检测和比较．结果显示：SMYD3亚型1启动子的转录活性要显著高于亚型2启动子，生物信息学分析提示其原因可能与舍有转录因子E2F．1结合位点的串联重复序列有关．关键词：SMYD3；启动子；转录活性中图分类号：Q786文献标志码：A文章编号：1672—6510(2014)04—0006—05ComparisonofTranscriptiOnalActivitiesofDifferentHumanSMYD3IsoformsLIULei，LUOXuegang，ZHAOWenwen，MUAi，X1NZ

3、hongshuai，ZHANGTongcun(1．KeyLaboratoryofIndustrialFermentationMicrobiology，MinistryofEducation，TianjinKeyLaboratoryofIndustrialMicrobiology，CollegeofBiotechnology，Tia州inUniversityofScience＆Technology，Tianjin300457，China；2．NationalInstituteforFoodandDrugControl，Beijing100050，China)Abstr

4、act：Inthisstudy，promotersoftwoisoformswereclonedwithPCRmethodandthentheirluciferaserepo~erplas—midswereconstructed．UsingthemethodofLuciferaseAssay，thetranscriptionalactivitiesofthesetwopromotorsofSMYD3weredetectedinCOS·7cells．Resultsshowedthatthetranscriptionalactivityofthepromoterofis

5、oformlishigherthatthatofthepromoterofisoform2．BioinformaticsanalysesindicatedthatthesignificantdiferenceinthetranscriptionalactivitybetweenthesetwopromotersmightbeduetothetandemrepeatsofE2F一1bindingsiteslocatedinthepromoterofisoforrn1．Keywords：SMYD3；promotor；transcriptionalactivitySMYD

6、3(SETandMYNDdomaincontaining3)是的差异，迄今尚未见报道．本文通过构建SMYD3两近年来发现的一种具有组蛋白甲基化活性的组蛋白个亚型启动子荧光素酶报告质粒，通过报告分析方法甲基转移酶．研究[1-2]发现，SMYD3在肝癌、乳腺癌检测二者启动子转录活性差异，并结合生物信息学分及直肠癌中呈现过表达状态，提示其可能在肿瘤的发析，探讨二者启动子差异在SMYD3转录调节中的影生和发展过程中发挥重要的作用．SMYD3可显著增响，为进一步研究sMYD3在肿瘤发生发展中的作用强肿瘤细胞增殖、粘附及迁移能力，并促使细胞发生机制以及新型抗肿瘤药物研发提供理论

7、指导．恶性转化，采用shRNA特异性干扰SMYD3基因后则可以明显抑NgL腺癌、宫颈癌等癌细胞的增殖与迁1材料与方法移能力，并诱导其凋亡【jJ．SMYD3具有两个亚型，分别由两个不同的启动1．1试剂与仪器子调控二者的转录过程．然而，对于SMYD3两种不pGL3一basic荧光素酶报告质粒、T4DNA连接同亚型的转录调控机制及其不同启动子转录活性间酶，美国Promega公司；TaqDNA聚合酶，北京全式收稿日期：201312~)5；修回日期：2014-4)3—11基金项目：国家自然科学基金资助项目(31000343，31300642，31071126)作者简介：刘