水稻中两个同源异型结构域转录因子的亚细胞定位-论文.pdf

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1、第34卷第3期天津师范大学学报(自然科学版)Vo1．34No．32014年7月JournalofTianjinNormalUniversity(NaturalScienceEdition)Ju1．2014文章编号：1671．1114(2014)03—0062—04水稻中两个同源异型结构域转录因子的亚细胞定位李政龙，申奥，栾维江(天津师范大学a．生命科学学院，b．天津市动植物抗性重点实验室，天津300387)摘要：为了对水稻同源异型结构域转录因子HD—ZipⅢ家族中的HDZ1和HDZ2进行亚细胞定位，利用RT—PCR技术从水稻cDNA

2、中扩增HDZ1和HDZ2的编码区(去除终止密码子序列)，与绿色荧光蛋白GFP编码框融合，构建2个转录因子的瞬时表达载体，采用农杆菌介导的转化方法转化至烟草中进行瞬时表达分析．结果表明：PCR扩增所得为目的基因片段HDZ1和HDZ2；二者与载体质粒pCAMBIA35S—GFP连接获得的融合表达我体成功移至烟草中并表达；确定HDZ1主要定位于烟草叶片的气孔中，而HDZ2定位于烟草表皮细胞的细胞膜上．二者在亚细胞中的定位不同，可能在水稻生长发育中所起的作用也不相同．关键词：水稻；同源异型结构域HD—Zipm；转录因子；绿色荧光蛋白；亚细胞

3、定位中图分类号：Q943．2文献标志码：ASubcellularlocalizationoftwotranscriptionfactorswithhomeodomaininriceLIZhenglong，SHENAo，LUANWeijiang(a．CollegeofLifeScience，b．TianjinKeyLaboratoryofAnimalandPlantResistance，TianjinNormalUniversity，Tianjin300387，China)Abstract：Toinvestigatethesubcel

4、lularlocationsofHDZ1andHDZ2inrice，whichbelongtohomeodomaintranscriptionfactorsHD-Zipm，thecodingregionsofHDZ1andHDZ2(withoutthesequenceofterminationeodon)wereamplifiedfromcDNAofriceseedlingsbyRT—PCR，andthenfusedwithgreenfluorescentprotein(GFP)toconstructtwotransientGFPf

5、usionvectors．Theanalysisoftransientexpressionwasca~iedoutbyAgrobacterium—mediatedtransformationintoleavesoftobacco．Theresultshowedthat：TwogenesobtainedbyPCRweretargetgenesindeed；BothofthemwereconnectedwithpCAMBIA35S—GFPandtransformedintoleavesoftobaccobyAgrobacteriumsu

6、ccessfully；ItiscertainthatHDZ1ismainlylocalizedinstomaofleaves，andHDZ2localizedincellmembrane．HDZ1andHDZ2arelocalizedindifferentsubcellularparts，whichdemonstratethatthetwofactorsmayplaydifferentrolesindevelopmentprocessofrice．Keywords：rice；homeodomainHD—Zipm；transcript

7、ionfactors；greenfluorescentprotein；subcellularlocalization同源异型盒(homeobox，HB)是同源异型基因中W0X(Wuschel—relatedhomeobox)和zF_HD(zincfinger-都具有的保守基序，广泛存在于动物、植物和微生物homeodomain)[21．其中，HDZip由DNA同源异型结构中．该序列出现在真核生物进化的早期，在生物发育域和附加的leucine—zipper(亮氨酸拉链)元件组成[31，中具有重要功能u．由同源异型盒编码的蛋白序列称主要

8、参与调控植物正常生长以及环境胁迫后植物的为同源异型结构域(homeodomain，HD)．植物HB转录生长发育．根据结构域的保守性、序列结构以及生理因子家族可分为6类：HD—Zip(homeodomain—leucine—学功能，HD