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时间:2020-04-23
《水稻中两个同源异型结构域转录因子的亚细胞定位-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、第34卷第3期天津师范大学学报(自然科学版)Vo1.34No.32014年7月JournalofTianjinNormalUniversity(NaturalScienceEdition)Ju1.2014文章编号:1671.1114(2014)03—0062—04水稻中两个同源异型结构域转录因子的亚细胞定位李政龙,申奥,栾维江(天津师范大学a.生命科学学院,b.天津市动植物抗性重点实验室,天津300387)摘要:为了对水稻同源异型结构域转录因子HD—ZipⅢ家族中的HDZ1和HDZ2进行亚细胞定位,利用RT—PCR技术从水稻cDNA
2、中扩增HDZ1和HDZ2的编码区(去除终止密码子序列),与绿色荧光蛋白GFP编码框融合,构建2个转录因子的瞬时表达载体,采用农杆菌介导的转化方法转化至烟草中进行瞬时表达分析.结果表明:PCR扩增所得为目的基因片段HDZ1和HDZ2;二者与载体质粒pCAMBIA35S—GFP连接获得的融合表达我体成功移至烟草中并表达;确定HDZ1主要定位于烟草叶片的气孔中,而HDZ2定位于烟草表皮细胞的细胞膜上.二者在亚细胞中的定位不同,可能在水稻生长发育中所起的作用也不相同.关键词:水稻;同源异型结构域HD—Zipm;转录因子;绿色荧光蛋白;亚细胞
3、定位中图分类号:Q943.2文献标志码:ASubcellularlocalizationoftwotranscriptionfactorswithhomeodomaininriceLIZhenglong,SHENAo,LUANWeijiang(a.CollegeofLifeScience,b.TianjinKeyLaboratoryofAnimalandPlantResistance,TianjinNormalUniversity,Tianjin300387,China)Abstract:Toinvestigatethesubcel
4、lularlocationsofHDZ1andHDZ2inrice,whichbelongtohomeodomaintranscriptionfactorsHD-Zipm,thecodingregionsofHDZ1andHDZ2(withoutthesequenceofterminationeodon)wereamplifiedfromcDNAofriceseedlingsbyRT—PCR,andthenfusedwithgreenfluorescentprotein(GFP)toconstructtwotransientGFPf
5、usionvectors.Theanalysisoftransientexpressionwasca~iedoutbyAgrobacterium—mediatedtransformationintoleavesoftobacco.Theresultshowedthat:TwogenesobtainedbyPCRweretargetgenesindeed;BothofthemwereconnectedwithpCAMBIA35S—GFPandtransformedintoleavesoftobaccobyAgrobacteriumsu
6、ccessfully;ItiscertainthatHDZ1ismainlylocalizedinstomaofleaves,andHDZ2localizedincellmembrane.HDZ1andHDZ2arelocalizedindifferentsubcellularparts,whichdemonstratethatthetwofactorsmayplaydifferentrolesindevelopmentprocessofrice.Keywords:rice;homeodomainHD—Zipm;transcript
7、ionfactors;greenfluorescentprotein;subcellularlocalization同源异型盒(homeobox,HB)是同源异型基因中W0X(Wuschel—relatedhomeobox)和zF_HD(zincfinger-都具有的保守基序,广泛存在于动物、植物和微生物homeodomain)[21.其中,HDZip由DNA同源异型结构中.该序列出现在真核生物进化的早期,在生物发育域和附加的leucine—zipper(亮氨酸拉链)元件组成[31,中具有重要功能u.由同源异型盒编码的蛋白序列称主要
8、参与调控植物正常生长以及环境胁迫后植物的为同源异型结构域(homeodomain,HD).植物HB转录生长发育.根据结构域的保守性、序列结构以及生理因子家族可分为6类:HD—Zip(homeodomain—leucine—学功能,HD
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