水稻抗白叶枯病相关基因的亚细胞定位-论文.pdf

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1、浙江农业学报ActaAgriculturaeZhefiangensis，2014，26(3)：693-701http：／／www．zjnyxb．an陈斌，李冬月，王栩鸣，等．水稻抗白叶枯病相关基因的亚细胞定位[J]．浙江农业学报，2014，26(3)：693—701．DOI：10．3969／j．issn．1004—1524．2014．03．27水稻抗白叶枯病相关基因的亚细胞定位陈斌，李冬月，王栩鸣，周洁，严成其，陈剑平，(安徽农业大学生命科学学院，安徽合肥230061；浙江省农业科学院病毒与生物技

2、术研究所，浙江省有害生物防控国家重点实验室培育基地，农业部植保生物技术重点实验室，浙江省植物病毒重点实验室，浙江杭州310021；浙江师范大学化学与生命科学学院，浙江金华321004)摘要：利用亚细胞定位技术对水稻抗白叶枯病相关基因的表达产物进行了分析，为基因功能分析提供了重要信息。通过前期基因芯片筛选、半定量／定量PCR的验证及基因功能注释，从高抗白叶枯病水稻品种Y73中筛选了18个潜在的与抗白叶枯病相关的基因，并在烟草叶片细胞中进行亚细胞定位分析。通过观察融合有绿色荧光标记(sGFP)的表达产

3、物，初步了解这些基因在烟草细胞中的表达位置。经过激光共聚焦显微镜观察后发现：其中4个基因的sGFP融合蛋白定位于细胞核上，可能发挥了转录因子的功能；4个基因的sGFP融合蛋白定位于细胞质膜上，推测可能与细胞质膜的稳定或控制蛋白转运相关；4个基因的sGFP融合蛋白同时定位于细胞核和细胞质膜上；另有6个基因的sGFP融合表达后没有观察到明显的定位信号。关键词：水稻白叶枯病；抗病相关基因；亚细胞定位；sGFP中图分类号：S435．111．47文献标志码：A文章编号：1004—1524(2014)03-0

4、693-09SubcellularlocalizationofriceresistancegenestobacterialblightCHENBin1,2，LIDong—yue，WANGXu—ming，ZHOUJie，YANCheng—qi，CHENJian—ping’(SchoolofLifeSciences，AnhuiAgriculturalUniversity，Hefei230061，China；StateKeyLaboratoryBreedingBase，0rZhejiangSustain

5、ablePestandDiseaseControl，MOAKeyLaboratoryforPlantProtectionandBiotechnology，ZhejiangProvincialKeyLaboratoryofVirology，InstituteofVirologyandBiotechnology，ZhejiangAcademyofAgriculturalScience，Hangzhou310021，China；CollegeofChemistryandLifeSciences，Zhej

6、iangNormalUniversity，Jinhua321004，China)Abstract：Thesubcellularlocalizationofricebacterialblightrelatedgeneswereexaminedtoprovideimportantinformationforthestudyofgenefunction．Eighteencandidategeneswhichpotentiallyassociatedwithbacterialblightresistanc

7、ewereselectedfromY73byusinggenechip，semi—quantitative／quantitativePCRandfunctionannotation．Thesecandidategeneswerefusedwithgreenfluorescentmarker(sGFP)andsubcellularlocalizationoftheirproductsintobaccoleafcells．FourgenescombinedwithsGFPwerefoundmainly

8、locatedinthecellnucleus．showingt}letypicalcharacteristicsoftranscriptionfactors；Fourgeneswerefoundmainlylocatedintheplasmamembrane，indicatingtheirpotentialfunctionsofmaintainingthestabilityofthecellmembraneorintransportcontroloncellmembrane；Fo