核酸提取或纯化试剂说明书

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1、【储存条件及有效期】核酸提取或纯化试剂说明书1）试剂盒可在常温下运输。【产品名称】核酸提取或纯化试剂（商品名：Magabioplus病毒DNA/RNA纯化试剂盒）2）试剂盒保存：试剂盒2℃-8℃保存。（英文名称：：MagabioplusVirusDNA/RNAPurificationKit）3）有效期：本试剂盒有效期12个月，请在有效期内使用。【适用仪器】【包装规格】32人份/盒、50人份/盒、100人份/盒磁性分离架或博日NPA-32+核酸纯化仪，恒温金属浴或恒温水浴，漩涡振荡器。【预期用途】提取血清、血浆和体液样本中的病毒DNA和RNA。【样本要求】

2、【检验原理】如果样品体积不足200μl,可以加入合适体积的PBS缓冲液或生理盐水使总体积达到200μl。血清、血浆和体液样本中的病毒在裂解液的作用下核酸被释放出来，在结合液的存在下，释放出来的核酸特异性的结合在磁珠上，结合了核酸的磁珠粒子被磁性材料捕获，通过洗涤【检验方法】过程将污染物除去，最后在洗脱液的作用下将核酸从磁珠上洗脱下来并收集保存。一、若购买的是BSC57S1B和BSC57M1B,请按照下述手工提取检验方法操作【主要组成成份】A.样本前处理货号BSC57S1CBSC57S1BBSC57M1B1.针对血浆、血清、腹水等液体样本RNA病毒成份在1

3、.5ml无核酸酶离心管中加入500ul裂解液，然后加入200ul样品，充分振荡混匀。试剂盒组成32人份50人份100人份2.针对血浆、血清、腹水等液体样本DNA病毒裂解液25ml50ml表面活性剂和Tris缓冲液1)在1.5ml无核酸酶离心管中加入500ul裂解液，然后加入200ul样品，充分振荡混匀。2)将样本混合物在70℃温浴5分钟（如果病毒较难裂解可适当增加温浴时间）。去蛋白漂洗液※18ml※36ml高盐溶液96孔试剂板注：DNA/RNA病毒共提取样本处理参照DNA病毒。如果想提高RNA病毒检测灵敏度，可在裂洗涤液※6ml×2※12ml×2低盐溶液

4、解液中加入1%β-巯基乙醇。2块洗脱液10ml20ml低盐溶液B.样本提取操作1.在离心管中加入10ul的磁珠（使用之前磁珠应充分混匀），室温下颠倒混匀10分钟。磁珠0.5ml1ml表面包被硅基的磁性颗粒2.将离心管置于磁力架上1分钟，使管内磁珠被吸附，用移液器移走管内液体，取下离心管。说明书1113.加入500ul去蛋白漂洗液，使磁珠重新悬浮，将离心管置于磁力架上1分钟，用移液器移注：若购买的是BSC57S1B，使用前请在※18ml去蛋白漂洗液中加入※12ml无水乙醇,走管内液体，取下离心管。在※6ml洗涤液中加入24ml无水乙醇。4.加入500ul洗

5、涤液，使磁珠重新悬浮，将离心管置于磁力架上1分钟，用移液器移走管内若购买的是BSC57M1B，使用前请在※36ml去蛋白漂洗液中加入※24ml无水乙醇,液体，取下离心管。在※12ml洗涤液中加入48ml无水乙醇。5.再加入500ul洗涤液，使磁珠重新悬浮，将离心管置于磁力架上1分钟，用移液器移走管内液体，同时保持离心管置于磁力架上，使磁珠继续被吸附，室温晾干5min。【自备试剂】6.从磁力架上取下离心管，加入50ul-100ul洗脱液，使磁珠重新悬浮，55℃水浴5分钟，购买的是BSC57S1B和BSC57M1B，请自备无水乙醇（分析纯）。其间轻轻晃动两次

6、使核酸充分洗脱。127.将离心管置于磁力架1分钟，使磁珠被吸附，将液体转移至新的1.5ml无RNA酶离心管。附录：配套自动化仪器使用,以本公司生产的NPA-32+为例：注：如操作时，发现管壁和管盖有液体，请短暂离心使液体甩入管底，再置于磁力架上。1.试剂准备如要配套自动化仪器使用，深孔板裂解温度和洗脱温度需要调整优化。1)若购买的是BSC57S1B和BSC57M1B,请按照下述方法进行试剂准备。在2.2ml96孔深孔板第1、7列中各加入500μl裂解液，第2、8列中各加入500μl去蛋白漂【参考值】洗液，第3、4列和第9、10列中各加入500μl洗涤液，

7、第5、11列中加入50ul-100μl洗脱液，提取产物经高灵敏度HBVDNA检测试剂确定灵敏度到达10IU/ml；提取产物经高灵敏度HCV第6、12列中加入190ul纯水和10μl磁珠（注意：磁珠在使用之前必须充分混匀）。RNA检测试剂确定灵敏度到达100IU/ml。经国家标准品标定的质控品多次重复测试统计确定。2)若购买的是BSC57S1C,请按照下述方法进行试剂准备。将室温放置96孔试剂板颠倒3次，去除塑封膜后在96孔板离心机中短暂离心（或手甩），【检验结果的解释】避免挂液。撕去96孔试剂板上的铝箔膜，确认板子方向（磁珠在第6/12列）。本试剂盒适用

8、于血清、血浆样本，不适用于全血样本。2.在96孔板的第1及第7列孔中加入200µ