微生物的实验室培养_精校版.ppt

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1、课题1微生物的实验室培养专题2:微生物的培养与应用大肠杆菌菌落：单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。菌落细菌的菌落特征因种而异大肠杆菌单个菌落实验操作---大肠杆菌的纯化培养（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算－称量－溶化－调PH值－灭菌－倒平板（二）纯化大肠杆菌最常用的接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法（冷却至50℃）1.操作开始时灼烧接种环：每次划线前灼烧接种环：划线结束后灼烧接种环：避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；杀死上次划线结束后，接种环上

2、残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？以免接种环温度太高，杀死菌种。划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落平板划线接种第一区域第二区域第三区域第四区域第五区域平板

3、划线接种灼烧接种环冷却划线（第一区域）蘸取菌液灼烧接种环冷却划线（第二区域）灼烧接种环冷却划线（第三区域）灼烧接种环冷却划线（第四区域）灼烧接种环冷却划线（第五区域）灼烧接种环平板倒置放置培养微生物的恒温培养菌种的保存1、临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。2、长期保存：甘油冷冻管藏法