温度胁迫对白灵侧耳菌丝保护酶活性的影响

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1、食用菌学报@2010．17(2)：60-62文章编号：1005—9873(2010)02—0060—03温度胁迫对白灵侧耳菌丝保护酶活性的影响刘秀明。，郑素月。，图力古尔，黄晨阳。，张金霞。(吉林农业大学菌物研究所，吉林长春130118；。中国农业科学院农业资源与农业区划研究所，北京100081；。河北工程大学农学系，河北邯郸056038)摘要：以白灵侧耳(Pleurotusnebrodensis)菌株中农一号(CA．AS1)为试验材料，研究了温度胁迫(4℃和35℃)对菌丝体内超氧化物歧化酶(sup

2、eroxidedismutase，SOD)、过氧化物酶(peroxidase，POD)和过氧化氢酶(catalase，CAT)活性的影响。结果表明，温度胁迫导致3种保护酶活性均发生显著的变化。SOD活性随温度胁迫时间的延长先急剧升高后下降，在胁迫12h时均达到最大值(低／高温胁迫分别为46．23U／g和5O．33U／g)；POD活性呈现先升高后缓慢下降的趋势，在胁迫处理24h时达到最高值(低／高温胁迫分别为6．86U／g和7．22U／g)；CAT活性在胁迫处理12h内迅速上升，之后平稳上升。关键词：

3、白灵侧耳；温度胁迫；超氧化物歧化酶；过氧化物酶；过氧化氢酶白灵侧耳[Pleurotusnebrodensis(Inzenga)floridanus)少数食用菌中有相关报道_1。’u]。本Qu邑1．]子实体味道鲜美，肉质细腻、营养价值高，具研究试图通过测定SOD、CAT、POD三种保护酶有防治老年人心血管疾病、儿童佝偻病等药用功活性的动态变化，探讨白灵侧耳菌丝体对低温胁效，其多糖具有防癌抗癌作用]。由于白灵侧耳生迫和高温胁迫的生理反应。长周期较长，目前尚未实现工厂化。在非工厂化的1材料与方法栽培条件下

4、，因无法掌控气温骤变对白灵侧耳生长发育带来的影响，导致出菇期和产量预测困难。1．1供试菌株在逆境胁迫下，细胞内活性氧(R0S)代谢失国品认菌2007042中农一号(CAAS1)。去平衡而导致RoS的积累。ROS能直接与核1．2菌丝培养酸、蛋白质分子作用，导致膜脂过氧化、碱基突取直径5mm菌种，接种于加铺玻璃纸的变、DNA链断裂或蛋白质损伤I2]，使膜系统的结PDA平板上，25℃避光培养14d。随机分为16构和功能受到损伤~5]。研究表明由活性氧自由组，每组10皿；其中15组进行温度处理，即在不基导致

5、生物体内发生氧化的伤害程度依赖于其同温度(4、25和35℃)条件下避光培养不同时问自身所具有的抗氧化物质储备的有效性。超氧(12、24、36、48及60h)，取菌丝样品；另外1组不化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化经温度处理直接取样。将各处理菌丝分装人物酶(POD)等抗氧化酶作用尤为突出，是重要的1．5mL离心管中，液氮速冻后于一70℃下保存。细胞保护酶系统]。其中SOD是第一个参与活1．3粗酶液制备性氧清除反应的酶，在抗氧化酶类中处于核心地每处理称取3份1．0Og菌丝，液氮研磨，每

6、位[63。在通常情况下，S0D将o一歧化为H02份加入8mL预冷的50mmol／L磷酸钠缓冲液和O。，cAT和P0D酶促降解Ho，避免H0(pH7．0)，转入10mL离心管中，4℃，5438g的过量积累对细胞产生的伤害]。离心10min，上清液即为粗酶液。目前有关环境胁迫下植物细胞伤害的机制1．4活性测定已有很多报道，但在食用菌上研究较少，仅在草SOD、POD和CAT活性测定参照文献[12]菇(Volvariellavolvacea)、佛州侧耳(P．进行。收稿日期：2010—03～12原稿；2010

7、—05—12修改稿基金项目：国家科技支撑计划项目(编号：2008BADA1B02)的部分研究内容作者简介：刘秀明(1985一)，女，吉林农业大学菌类作物在读硕士研究生，主要从事菌物多样性方面研究。本文通讯作者E-mail：zhangjx1210@yahoo．corn．cn第2期刘秀明，等：温度胁迫对白灵侧耳菌丝保护酶活性的影响1．5数据统计分析2．3温度胁迫对白灵侧耳菌丝CAT活性影响应用SPSS12．0统计分析软件的单因素方差温度胁迫处理的菌丝POD活性与对照相比进行差异显著性分析。差异均极显著。

8、低温和高温胁迫12h均诱导CAT活性迅速上升，随着胁迫时间的延长，高温2结果与分析胁迫CAT活性缓慢升高，而低温胁迫12h后2．1温度胁迫对白灵侧耳菌丝SOD活性影响CAT活性变化则趋于平稳(图3)。随着温度胁迫时间的延长，SOD活性整体呈先升高后下降趋势。其中，低温和高温胁迫处理12h白灵侧耳菌丝体内S0D活性均达到最大蜒值(分别为46．23U／g和5O．33U／g)，是对照的8．7倍和9．5倍，然后下降，处理60h时，高温胁迫的SOD活性仍然显著高于对照，而低温胁