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《5-杂氮-2’脱氧胞苷对肝癌细胞中timp-3基因的作用》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、一340一现代消化及介入诊疗2013年第18卷第6期ModemDigestion&Intervention2013,Vo!No·6·论著·5一杂氮一2脱氧胞苷对肝癌细胞中TIMP一3基因的作用曾伟沈波聂玉强李爱民陈阮然【摘要】目的观察多株肝癌细胞中TIMP一3CpG岛的甲基化状况,观察甲基化药物5一杂氮一2脱氧胞苷对肝癌细胞株中TIMP一3基因表达及其CpG岛甲基化程度的影响。方法运用MSP定性检测8株肝癌细胞中TIMP一3CpG岛甲基化状况。使用去甲基化药物5一杂氮一2脱氧胞苷对甲基化阳性的细胞株进行干预
2、,观察干预组与对照组TIMP-3基因表达差异,并使用焦磷酸测序技术定量检测CpG岛甲基化差异。结果在8株肝癌细胞系中C3A、Hep一3B、HepG23株检测到TIMP一3CpG岛甲基化阳性。经去甲基化药物干预后,在这3株肝癌细胞中均发现TIMP一3mRNA的表达较对照组有明显上调(P<0.05),CpG岛的甲基化率下降(P<0.05)。结论甲基转移酶抑制剂能显著降低肝癌细胞株TIMP一3CpG岛甲基化程度及上调TIMP一3mRNA的表达。【关键词】肝癌;TIMP一3;甲基化;5一杂氮一2脱氧胞苷Theefe
3、ctof5..Aza—-CdRonTIMP——3geneinhepatocellularcarcinomaceHsZENGWei,SHENBo.NIEYu-qiang.LlAi—min,CHENRuan—ran.GuangzhouKeyLaboratoryofDigestiveDisease,DepartmentofGastroenterology,FirstMunicipalPeoplesHospitalofGuangzhou,GuangzhouMedicalUniversity,Guangzhou510
4、180,China【Abstract】ObjeetiveTheaimofthisstudyistoinvestigatetheCpGislandmethylationstatusofTIMP一3inHCCcelllines.totreatetheHCCcellsthatexhibitpositivemethylationwithDNAmethyltransferasein—hibitor(5-Aza-CdR),andtoobservetheinfluenceof5一Aza—CdRontheexpressio
5、nofTIMP一3mRNAanditsCpGislandmethylationdegree.MethodsTIMP-3CpGmethylationstatusofHCCcellswereexaminedusingMSPassay.Methylation—positiveHCCcellsweretreatedwithDNAmethyltransferaseinhibitor(5-Aza—CdR)(interventiongroup),andthedifferenceofTIMP-3mRNAexpression
6、wasobservedbetweeninterven—tiongroupandcontrolgroup.PyrosequencingmethodwasappliedtoquantitativelyexaminetheCpGislandmethylationpercentage.ResultsThemethylationofTIMP一3CpGislandsinC3A,HepG一2,andHep一3Bwaspositive.TheresultsshowedthatTIMP-3mRNAexpressionwasi
7、ncreased(尸<0.05)andthemethylationlevelwasdecreased(P<0.05)intheinterventiongroupcomparedtocontrolgroup.Conclusion5-Aza—CdRcouldremarkablyreducetheleveloftheCpGislandmethylationandincreasetheexpressionofTIMP-3mR—NAinHCCcells.【Keywords】HCC;TIMP-3;Methylation
8、;5-Aza一2'-deoxycytidineDNA的甲基化属于表观遗传学范畴.它对基因从而生成甲基化DNA。人类中DNA甲基化大多发表达的调控不依赖于基因序列改变,DNA甲基转移生于CpG二核苷酸的胞嘧啶上DNA甲基化通常通酶(DNAmethyltransferase,DNMTs)将甲基集团催过抑制转录因子与启动子结合【1J,改变染色质结构,化,转移到5'-CpG一3中胞嘧啶的第五位碳原子上。促进转录抑制子的结
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