绿豆NBS-LRR类抗病基因同源序列的克隆与分析-论文.pdf

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1、福建农业学报29(1)：35～39，2014FujianJournalofAgriculturalSciences文章编号：1。08—0384(2014)O1—35—05罗灵杰，周以飞，柯兰兰，等．绿豆NB&LRR类抗病基因同源序列的克隆与分析EJ7．福建农业学报，2014，29(1)：35—39．LUOL-J，ZHOUY—F，KEL-L，eta1．CloningandAnalysisofNBS-LRRTypeResistanceGeneAnaloguesinVignaradiataEJ]．FujianJournalofAgriculturalScience

2、s，2014，29(I)：35—39．绿豆NBS—LRR类抗病基因同源序列的克隆与分析罗灵杰，周以飞。，柯兰兰，潘大仁卜(1．福建农林大学生命科学学院，福建福州350002；2．福建农林大学作物学院，福建福州350002)摘要：根据已知的拟南芥SPR2基因、烟草抗花叶病毒N基因、亚麻L6基因等NB&LRR抗病类基因(RGAs)保守序列设计引物，从野生绿豆基因组DNA中分离得到了1条515bp大小的目的片段，并命名为FGV-1(GenBank登录号为KF021265)。经BIAST分析表明，分离的绿豆RGAs与已报道的大豆、豇豆、芸豆等植物的RGAs有较高的同

3、源性。通过对其编码的氨基酸序列分析表明，FGV-1基因翻译的氨基酸序列中含有植物抗病基因NBS—LRR区域的4个保守结构：GMGGVGKTT、LILDDVD、GSRVIVTTRD及GLPLA，推测FGV-1可能是绿豆NB~LRR类抗性基因的核心区域。绿豆RGAs的分离将为进一步从绿豆中分离功能性抗病基因打下基础，也为研究绿豆种质资源的起源与进化提供借鉴。关键词：绿豆；NB~LRR；抗病类基因；同源克隆；聚类分析中图分类号：S565文献标识码：ACloningandAnalysisofNBS—LRRTypeResistanceGeneAnaloguesinVi

4、gnaradiataLU0Ling-jie。ZHOUYi—fe。KELan-lan，PANDa—ren(1．CollegeofLifeScience，FujianAgricultureandForestryUniversity，Fuzhou，Fujian350002，China；2．CollegeofCropScience，FujJanAgricultureandForestryUniversity，Fuzhou，Fujian350002，China)Abstract：Degenerateprimersbasedonconservedsequencesoft

5、henucleotidebindingsiteand1eucinerichrepeats(NBS-LRR)regionfromtheclonedplantdiseaseresistancegeneswereusedtoisolateresistancegeneanalogues(RGAs)fromgenomicDNAofVignaradiata．Thedesiredband(515bp)wasclonedandsequenced．ThebandwasnamedFGV-1andhadbeensubmittedtoGenbank(accessionnumberK

6、F021265)．BlastxanalysshowedhighlyhomologywiththereportedresistancegeneanaloguesGlycinemax。ⅥgnaunguiculataandPhaseolusvulgaris．TheanalysisofRGAsaminoacidsequencestructuressuggestedthatFGV-1wasthecoreregionofNBS-IRRresistancegenesinVignaradiata，whichcontainedfourconserveddomainsinclu

7、dingGMGGVGKTT，LILDDVD，GSRVIVTTRDandGLPIAL．TheRGAsisolatedfrom17ignaradiatausedinthisstudywouldprovidethebaseforthefurthercloningofdisease-resistancegenesinVignaradiata，andprovidereferencefortheoriginandevolutionofVignaradiata。Keywords：Vignaradiate；NBS-LRR；RGA；Homologycloning；Sequen

8、ceanalysis植物在自然环境中会受到病毒、细菌