培养基的主要成分及其作用.doc

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1、培养基的主要成分及其作用1.营养物质营养物质提供细菌生长繁殖所需的能量、合成菌体的原料以及激活细菌酶的活性和调节渗透压等作用。细菌需要的营养物质主要有氮源、碳源、无机盐及生长因子。（1）蛋白月东：是由动物或植物蛋白质经或酸碱分解而产生的中间产物,是培养基中最常用的成分之一，主要供给细菌氮源，合成菌体蛋白质、酶类等，另外还具有缓冲作用。由于蛋白质的来源和消化程度不同，因而制得的蛋白月东质量相差很大。按照生产原料的性质，蛋白腺可分为植物腺和动物月东两类。蛋白月东经喷雾干燥成粉末，吸水性较强，保存时应干燥密封，防止潮解结块

2、。（2）肉浸液：系用新鲜牛肉（去掉脂肪、肌膜及肌腱等）浸泡煮沸制成的肉汤。肉浸液中包括含氮和非含氮两类浸出物，还有一些生长因子。作为细菌生长所需要的氨源和碳源，由丁加热后大部分蛋白质凝固，仅留少部分氨基酸和其他含氮物质，不能满足细菌生长需耍，故在制作培养基时,一般需加1%〜2%蛋白月东和0.5%的NaClo（3）牛肉膏：又称牛肉浸膏，是肉浸液加热浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。英中不耐热的物质如糖类己被破坏，故英营养价值不及肉浸液，但因无糖，可作为肠道细菌鉴别培养基的基础成分。（4）糖（醇）类:含有细菌所需的

3、碳源。制备培养基所应用的糖（醇）类很多,常用的糖类冇单糖（如葡萄糖、阿拉伯糖等）、双糖（如乳糖、蔗糖等）、多糖（如菊糖、淀粉等）：醇类有甘露醇、卫矛醇及侧金盏花醇等。在培养基中加入糖(醇)类物质，除提供细菌作为碳源和能源外，主要利用细菌对糖(醇)类利用能力的差异鉴别细菌。(5)血液：血液除能增加培养基中蛋白质、多种氨基酸、糖类及无机盐等营养成分外，尚能提供辅酶、血红素等特殊生长因子。此外，还可以观察细菌的溶血现象。(6)鸡蛋与动物血清：此二者虽非基本成分，但对某些营养要求高的则是必需成分，如培养结核分枝杆菌的鸡蛋培养

4、基和培养白喉棒状杆菌的吕氏血清斜血等。(7)无机盐:生长繁殖需要多种无机盐类,其需要浓度在10-3-10-4mol/Lo的元素为常用元素，其需耍浓度在10-6^10-8mol/L的元素为微量元素。前者如磷、硫、钾、钠、镁、钙及铁等；后者如钻、锌、猛及铜等。(8)生长因子：是一些细菌生长所必需而自身不能合成的物质。通常为有机化合物，包括B族维生素、某些氨基酸、嚓吟及卩密噪等。少数细菌还需要特殊的生长因子，如流感嗜血杆菌需要X因子和V因子。这些生长因子常存在于动物血清、酵母浸液、肝浸液及鸡蛋等中。因此，在培养营养要求高的

5、细菌时，常加入上述物质，以满足其生长需要。1.水水是良好的溶剂，所需耍的营养物质必须先溶于水，营养的吸收与代谢均需有水才能进行。制备培养基常用不含杂质的蒸憾水或离子交换水。2.凝固物质即赋形剂。制各固体时，必须加入凝固物质，女n、明胶、卵白蛋白及血清等。理想的凝固物质应具冇以下特性：①本身不被细菌利用；②在微生物生长温度范围内保持固体状态，凝固点的温度对微生物无害：③不因消毒灭菌而破坏，透明度好，黏着力强。目前认为最合适的凝固物质是琼脂。(1)琼脂：是从石花菜、紫菜及江篱类海生植物中提取的一种胶体物质,其化学成分主要

6、为胶体多糖类。具有在100°C溶解，45°C以下时凝固的特性。琼脂本身无营养价值，仅作为培养基的赋形剂。(2)明胶：是由动物胶原组织(如皮、肌腱等)经煮沸熬制而成，主要含蛋白质。由于此类蛋白质缺乏必需氨基酸，故营养价值不大。明胶制成的培养基在24°C以上溶解，20°C以下凝固，故不宜在35~37°C环境中培养。因冇些细菌可分解明胶使其液化，所以一般不用明胶作赋形剂，但可用于制各鉴别培养基，观察细菌对明胶有无液化作用。1.抑制剂是一类能抑制或减少非检出菌生长而冇利于检出生长的物质。抑制剂种类很多，如胆盐、煌绿、玫瑰红酸

7、、亚硫酸钠、某些染料及多种抗生素等。不同培养基应根据需要选择合适的抑制剂。2.指示剂为了观察和鉴别细菌是否分解利用糖类、氨基酸等物质，常在某些培养基屮加入一定种类的指示剂。常用的酸碱指示剂有酚红、漠甲酚紫、澳麝香草酚蓝、中性红及甲基红等。在进行厌氧菌培养时，还需在培养环境屮加入氧化还原指示剂，常用的有亚甲蓝和刃天青。