水稻AFLP指纹图谱的引物选择研究.pdf

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1、中国农业科学ussuovxkzl}zvvpzvz≥¦¬¨±·¬¤ªµ¬¦∏¯·∏µ¤≥¬±¬¦¤水稻ƒ°指纹图谱的引物选择研究张春庆o贾继增k中国农业科学院作物品种资源研究所o北京tsss{tl摘要}通过对适合制作水稻品种ƒ°指纹图谱的引物进行研究o初步建立了一套快速有效地制作ƒ°指纹的引物选择法}第t步o选择亲缘关系相近的v组以上材料o保证组内材料遗传差异较小o组间有一定差异~第u步o利用两端相同的ty对unu引物组合选择扩增o初步选出具有一定多态性的引物~第v步o对具有一定多态性的引物重新组合o构成两端不同的unu引物组合o选出多态性较高的引物组合~第w步o将

2、多态性较高的unu引物的一端增加t个选择碱基o构成unv或vnu引物组合o筛选多态性更强!谱带较多!质量较好的引物组合~第x步o随机选择部分品种验证所选引物的有效性∀选出了ut°{z和zv°tz等多态性高!谱带多!带纹清晰的引物组合o为水稻品种ƒ°指纹图谱制作奠定了基础∀关键词}水稻~ƒ°~指纹≥·∏§¬¨¶²±·«¨°µ¬°¨µ¶≥¦µ¨¨±¬±ª©²µƒ°ƒ¬±ª¨µ³µ¬±·¶²©¬¦¨≤∏¯·¬√¤µ¶≤«∏±2´¬±ªo¬2½¨±ª(ΙνστιτυτεοφΧροπΓερμπλασμΡεσουρχεσ,ΧηινεσεΑχαδεμψοφΑγριχυλτυρα

3、λΣχιενχεσ,Βειϕινγ100081)¥¶·µ¤¦·}ƒ°k¤°³¯¬©¬¨§©µ¤ª°¨±·¯¨±ª·«³²¯¼°²µ³«¬¶°l¬¶¤√¨µ¼³²º¨µ©∏¯©¬±ª¨µ³µ¬±·¬±ª·¨¦«±²¯²ª¼q׫¨®¨¼²©°¤®¬±ª√¤µ¬¨·¼©¬±ª¨µ³µ¬±·¶¬¶·²¶³¨¦¬¤¯¯¼¶¨¯¨¦·³²º¨µ©∏¯³µ¬°¨µ¶©²µ¨¤¦«¦µ²³q©¤¶·¤±§¨©©¨¦·¬√¨³µ²¦¨§∏µ¨²©¶¨¯¨¦·¬±ªƒ°³µ¬°¨µ¶©²µµ¬¦¨√¤µ¬¨·¼©¬±ª¨µ³µ¬±·¬±ªº¤¶¶¨·∏³}ktl¦«²²¶¬±ªv²

4、µ°²µ¨ªµ²∏³°¤2·¨µ¬¤¯¶·«¤·«¤√¨¦¯²¶¨ª¨±¨·¬¦µ¨¯¤·¬²±¶º¬·«¬±ªµ²∏³¶~kul¶¨¯¨¦·¬±ª³²·¨±·¬¤¯³²¯¼°²µ³«¬¦unu³µ¬°¨µ¶º¬·«¶¤°¨¨±§¶~kvlµ¨¦²°¥¬±¬±ª·«¨¶¨¯¨¦·¨§³²·¨±·¬¤¯³²¯¼°²µ³«¬¦³µ¬°¨µ¶¤±§¦«²²¶¬±ª°²µ¨³²¯¼°²µ³«¬¦³µ¬°¨µ¶~kwl¤§§¬±ª²±¨¶¨¯¨¦·¬±ª¥¤¶¨¤·²±¨¨±§·²¥¨¦²°¨unv²µvnu³µ¬°¨µ¶¤±§©∏µ·«¨µ¶¨¯¨¦·¬±ª°²µ¨³²¯

5、¼°²µ³«¬¦³µ¬°¨µ¶qkxl¶²°¨³µ¬°¨µ¶º¨µ¨¶¨¯¨¦·¨§º¬·«·«¬¶³µ²¦¨§∏µ¨o¶∏¦«¤¶ut°{z¤±§zv°tzoº¬·«º«¬¦«·«¨©¬±2ª¨µ³µ¬±·¶«¤§°²µ¨³²¯¼°²µ³«¬¶°¤±§«¬ª«´∏¤¯¬·¼q¨¼º²µ§¶}¬¦¨~ƒ°~ƒ¬±ª¨µ³µ¬±·水稻是最重要的粮食作物之一o其品种指纹在选择研究o建立了一套快速有效地绘制品种ƒ°品种的产权保护!种子质量鉴定和种质评价中具有指纹的引物选择法o筛选出多态性强!谱带多!带纹重要的应用价值∀ƒ°技术的发展为建立稳定可清晰的引物组合o为水稻品种

6、的指纹图谱制作及品≈t 靠的品种指纹奠定了基础∀ƒ°技术有{s多种登记!保护奠定了基础∀该方法对其它作物指纹种选择引物o共ywss多种引物组合o但并非任何引图谱的研究也具有一定参考价值∀物组合都适合品种指纹制作o必须针对具体作物进1材料与方法行选择∀在大量引物组合中快速有效地选择出适合水稻品种ƒ°指纹绘制的引物组合o是水稻1q1材料ƒ°指纹图谱制作的关键o此前在这方面未见报供试水稻材料有w对o每对材料亲缘关系相近o道∀笔者对适合制作水稻ƒ°指纹的引物进行了这些材料由中国农业科学院作物育种栽培研究所水收稿日期}usstpswpuv基金项目}国家/九五0攻关课题k

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8、2stw2st2syl作者简介}张春庆kt

9、yv2lo男o山东临朐人o教授o博士o主要从事种子科学与技术研究o现在山东农业大学农学院工作∀ר¯}sxv{2{uwuwx{~ƒ¤¬}sxv{2{uwuuuy~∞2°¤¬¯}¦´½«¤±ª¶§¤∏q¨§∏q¦±zvw中国农业科学vx卷稻室提供∀中花{和中花

10、由取手u号r京系zΜ用ss和°ss预扩增o用两端碱基相同的unu引物京系tz组合花培植株选育而成∀中花tw和中花选择扩增o电泳!银染后对肉眼可辨的谱带进行统tx由中花{Μ沈农tsvvrus的ƒu代花培株选育计o在此基础上进一步组合引物o筛选多态性强的引而成∀中花tw

11、和中花tx