资源描述:
《Bcl_2基因修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗脑缺血的实验.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、#270#StrokeandNervousDiseases,Oct2009,Vol.16,No.5Bcl22基因修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗脑缺血的实验研究张小乔梅元武郑丽芳张红郭远瑾徐江华=摘要>目的观察Bcl22基因修饰的骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对大鼠脑缺血性损伤的治疗作用及对移植的MSCs保护性作用。方法将114只SD大鼠随机分为假手术组、Model组、MSCs组和Bcl222MSCs组;线栓法制作大鼠一侧大脑中动脉缺血再灌注模型,MSCs组及Bcl222MSCs组在缺血24h后经尾静脉注射方式移植BrdU标记的MSCs及人Bcl22基因修饰的MSCs;
2、分别于术后1、7、14、28d对各组大鼠进行神经功能缺损评分(NSS);在脑缺血14d应用TTC法观察梗死灶体积;BrdU和TUNEL免疫荧光双重标记检测移植的MSCs凋亡情况;Westernblot检测大鼠脑梗死周边区Bcl22蛋白的表达;HE染色观察脑组织病理形态。结果MSCs2Bcl22组和MSCs组NSS评分、脑梗死体积百分比、TUNEL阳性细胞数较Model组低(P<0.05),且MSCs2Bcl22组比MSCs组更低,BrdU阳性细胞数较多(P<0.05);MSCs2Bcl22组BrdU和TUNEL免疫荧光双标细胞数稍多,但差异不显著(P>0.05),而MS
3、Cs2Bcl22组BrdU和TUNEL免疫荧光双标细胞占BrdU阳性细胞百分比明显较低(P<0.05)。MSCs2Bcl22组Bcl22蛋白呈持续较高水平的表达,和MSCs组同时间点相比差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色示MSCs组和MSCs2Bcl22组脑组织损伤及细胞丢失较轻,MSCs2Bcl22组更明显,脑梗死周边区均未见到核大、浓染的异形细胞。结论Bcl22基因修饰的MSCs移植较MSCs移植能进一步改善脑缺血大鼠的神经功能,减少脑梗死体积;其机制为Bcl22基因修饰使MSCs持续、稳定表达一定量的Bcl22蛋白,从而能保护移植的MSCs,减少其凋亡,增
4、加其存活。=关键词>Bcl22基因修饰骨髓间充质干细胞移植脑缺血=中图分类号>R743=文献标识码>A=文章编号>100720478(2009)0520270206TherapeuticbenefitofintravenoustransplantationofBcl22gene2modifiedMSCsaftercerebralischemiainratsZhangXiaoqiao*,MeiYuanwu,ZhengLifang,etal.*Departmentofcadre'sward,TaiheHospi2tal,YunyangMedicalCollege,Shiya
5、n442000=Abstract>ObjectiveTosurveythetherapeuticbenefitofintravenoustransplantationofBcl22gene2modifiedMSCsafterischemiainratsandtheprotectiveeffectofBcl22gene2modificationtotransplantedMSCs.MethodsTheratmodeloffocalcerebralischemiawasestablishedwithunilateralmiddlecerebralarterysutureoc
6、clusionmethodandreperfused2hlaterwithsutureextracted.RatsinMSCsgroupandBcl222MSCsgroupweretransplantedMSCsandhumanBcl22gene2modifiedMSCslabeledwith52bromodeoxy2uridine(Br2dU)respectivelythroughtailveinintravenousinjection.Neurologicalfunctionofratswasevaluatedwithmodi2fiedNeurologicalSev
7、erityScores(NSS)afterischemia.Cerebralinfarctionvolumeofratswasobservedthroughtetrazoliumchloride(TTC)staining.BrdUandterminaldeoxynucleotidetransferase2mediateddUTPnickend2labeling(TUNEL)immunofluorescencedoublelabelingtechniquewasusedtodetectapoptosisoftransplantedMSCs.