肺支肺衣沙眼衣原体三重使用说明书.pdf

《肺支肺衣沙眼衣原体三重使用说明书.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、YZ-RD-038版号/修改号A/0共5页第1页沙眼衣原体、肺炎衣原体和肺炎支原体核酸检测试剂盒（荧光PCR法）使用说明书【产品名称】通用名称:沙眼衣原体、肺炎衣原体和肺炎支原体核酸检测试剂盒（荧光PCR法）英文名称:Chlamydiatrachomatis,ChlanlydiapneumoniaeandMycoplasmapneumoniaeDiagnosticKit（PCRFluorescenceProbing）【包装规格】16人份/盒【预期用途】本试剂盒用于人鼻咽拭子或痰液样本中沙眼衣原体（Chlamydiatrachomatis，CT）、肺炎衣原体（Chlanlydiapn

2、eumoniae，CP）和肺炎支原体（Mycoplasmapneumoniae，MP）核酸的定性检测，可用于沙眼衣原体、肺炎衣原体和肺炎支原体感染的临床辅助诊断。肺炎衣原体属严格的人类病原体，目前只有一种血清型，肌体针对肺炎衣原体的感染免疫力弱，易形成持续感染和反复感染，且人群普遍易感，其感染可引起呼吸系统疾病，如肺炎、咽炎、喉炎、支气管炎等。肺炎支原体通常导致轻微的上呼吸道感染，如咽喉炎和气管炎等，但可引起肺外并发症，累及一个或多个系统、器官，如皮肤、胃肠道、心血管、骨骼肌肉和肾脏，严重可致中枢和外周神经系统病变，甚至死亡，通过飞沫以气溶胶形式传播，存留在鼻、喉、气管和痰液中，密

3、切接触可引起肺炎支原体的暴发。沙眼衣原体引起多种疾病，如沙眼，人类泌尿生殖道疾病，还可以通过母婴传播新生儿眼结膜炎、肺炎，并可导致胎膜早破、早产、新生儿死亡等，也是导致婴儿下呼吸道感染及黄疸的主要原因之一。临床或实验室检测方法有酶联免疫法和分离培养法等方法。实验操作人员应接受过基因扩增或分子生物学方法检测的专业培训，具备相关的实验操作资格，实验室应具备合理的生物安全防备设施及防护程序。【检验原理】本试剂盒采用胍盐裂解、自动化磁珠抽提的方法从样本中提取沙眼衣原体、肺炎衣原体和肺炎支原体核酸，采用聚合酶链式反应（PCR）结合Taqman荧光探针技术对人鼻咽拭子或痰液样本中沙眼衣原体、肺

4、炎衣原体和肺炎支原体核酸进行检测。【主要组成成份】呼吸道病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）（16人份）包括以下组分：数量序号标签成份（16人份/盒）1CCMBuffer含MgCl2等1管（120μL/管）含CT、CP和MP检测引物、2CCMPP1管（40μL/管）探针等3EUmix含Taq和UNG酶1管（10μL/管）4CCM强阳性质控品含CT、CP和MP目的基因1管（500μL/管）5CCM弱阳性质控品含CT、CP和MP目的基因1管（500μL/管）6CCM内标含内标基因1管（200μL/管）7ddH2O水1管（1mL/管）【储存条件及有效期】YZ-RD-038版号/修改号A/0

5、共5页第2页包装后的试剂盒，应避光密闭保存于-20℃。有效期暂定为6个月。采用泡沫盒加干冰或冰袋密封进行运输。试剂盒在4℃避光条件下暂存时间不宜超过7天（超过7天效果未验证）；不宜在37℃条件下放置超过72小时；反复冻融超过7次效果未验证。【适用仪器】本试剂盒适用于StratageneMX3000P、ABI7500实时荧光定量PCR仪。【样本要求】样本采集的对象是沙眼衣原体、肺炎衣原体肺炎支原体感染如肺炎、支气管炎、肺脓疡、免疫性溶血性贫血、脑膜脑炎、心肌炎、心包炎、肾炎、社区获得性肺炎等疾病患者或疑似患者。样本采集过程中注意无菌操作。采集的样本为患者或疑似患者咽拭子或痰液。咽拭子

6、在病人发病3天内采集，采用专用咽拭子，先用生理盐水将棉拭子沾湿，用棉签适度用力擦拭双侧咽后壁部位，应避免触及舌部，采集完毕，迅速放入含3mL的无菌生理盐水的采用管中，拧紧盖子。临床标本在运输和贮存过程中要避免反复冻融，如果不能确保-20℃的条件，应该在0--8℃运输。-20℃保存期限是4个月，-70℃可以长期保存。运输和保存过程中要附有必要的信息，如标本编号、发病日期和标本采集日期。【检验方法】1样品处理样本处理请参照核酸抽提试剂盒说明书进行，需要进行内标试验时，请在样本处理过程中，在添加样本时，同时加入内标。CCM强阳性质控品和CCM弱阳性质控品可以与样本进行平行处理，也可以不进

7、行抽提步骤，直接取5μL加入PCR反应液中进行扩增反应。2扩增试剂准备（PCRⅠ室）从试剂盒中取出CCMBuffer、CCMPP和水，在冰上或4℃融化，取出EUmix，轻微摇晃混匀并低速简短离心。取出1个无菌无核酸酶的离心管，做好标记，每人份按照下表进行反应体系的配置，PCR反应的总数应为样本个数、2个阳性质控、1个阴性抽提对照和1个PCR反应阴性对照的总和。试剂体积CCMBuffer6μLCCMPP2μLEUmix0.5μLddH2O11.5μL计算好各试剂使用量，