硒的存在形式和生物利用率及其对磷脂和胆固醇酯代谢的影响.pdf

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1、DissertationSubmittedtoZhejiangGongshangUniversityforMaster’SDegreeofEngineeringTHEDISTRIBUTIONANDBIOA、，AILABILITYOFSELENIUMANDITSEFFECTONTHEMETABOLlSMOFPHOSPHOLIPIDANDCHOLESTEROLESTERAuthor：YanleiYuMajor：FoodScienceandEngineeringSupervisor：ProfessorHongZhang'911De

2、c．2012CollegeofFoodScienceandBiotechnologyEngineering，ZhejiangGongshangUniversityHangzhou，310035，P．R．ChinaIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIlY2292251硒的存在形式和生物利用率及其对磷脂和胆固醇酯代谢的影响摘要本文以硒为研究对象，分析了其在南美白对虾蛋白和多糖中的分布情况以及硒在小鼠体内的生物利用率和对肠磷脂和胆固醇酯代谢的影响。全文主要分为两个部分，第一部分建立微波消解。电感耦合等离子体质谱法(MD．ICP

3、．MS)分析元素硒，通过提取南美白对虾中各类蛋白和多糖，确定硒的分布情况；第二部分建立了小鼠模型，通过饲喂不同浓度的硒，确定其生物利用率以及对肠磷脂和胆固醇酯代谢的影响。第一部分，首先建立了MD．ICP．MS分析微量元素硒的方法，优化了前处理条件和仪器参数。结果表明，该方法样品制备快速简单，在0．2～20腭／L浓度范围内线性关系良好(r--=o．9999)，检出限低，灵敏度高，且精密度(RSD

4、n-3)。然后采用顺序提取法，依次提取南美白对虾中水溶性蛋白、盐溶性蛋白、醇溶性蛋白和碱溶性蛋白，但未提到醇溶性蛋白，其它三种蛋白含量的相对百分比依次为碱溶性蛋白(63．17％)>水溶性蛋白(23．79％)>盐溶性蛋白(13．04％)；应用已建立的MD．ICP．MS法浙江工商大学硕士学位论文测定三种蛋13中的硒含量，结果显示碱溶性蛋白(1．320mg／kg)>盐溶性蛋白(1．283mg／kg)>水溶性蛋白(1．052mg／kg)，结合各蛋白提取物的提取率，可知蛋白硒占总硒的66．67％，可见硒在南美白对虾中主要以与蛋白结合的

5、形式存在；同时，提取南美白对虾中的多糖，多糖最佳提取条件为料液比(w／v)1：25，提取温度70。C，提取时间5h，提取次数1次，最终测得多糖的提取率为75．67％；文中比较了Sevag法、木瓜蛋白酶一Sevag法和胰蛋白酶-Sevag法脱蛋白的优劣，综合考虑蛋白质去除率和多糖损失率，选择胰蛋白酶酶解，Sevag法反复脱蛋白4次的工艺流程。应用己建立的MD．ICP．MS法测定提取的脱蛋白多糖中硒的含量为0．9114-0．014mg／kg(n寻3)，多糖硒占总硒的5．89％。第二部分，首先建立小鼠模型，饲喂不同浓度的来自南美白

6、对虾的硒，通过测定小鼠各器官及粪便中硒含量变化及肝脏和血液中硒依赖谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性变化，确定硒在小鼠体内的生物利用率。结果表明，分别补充2、8、16t,g／kg小鼠体重的含硒虾的实验组I、II和II相比于饲喂普通饲料的对照组，小鼠各器官中硒含量有不同程度的增加。在肝脏和肾脏样品中，相比于对照组，实验组I硒含量增加不显著；实验组lI表现出显著性差异(P<0．05)；实验组IⅡ则表现出极显著性差异(P

7、脏样品中，实验组I、lI和II昀表现出显著性差异(P

8、率；随后，应用已建立的小鼠模型，研究硒对小鼠肠中磷脂和胆固醇酯代谢的影响：采用电喷雾离子源，利用三重四极杆质谱的母离子扫描或中性丢失扫描功能，通过扫描磷脂和胆固醇酯的特征性子离子或中性质量丢失实现对三类磷脂(磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰丝氨酸)和胆固醇酯的定性和定量。结果表明，小鼠肠样