高毒力肺炎克雷伯菌KPC.pdf

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1、万方数据·3666·主垡匿堂苤鲞!!!堡堡!!旦!!旦笠!堡鲞笠堑塑盟堕!丛趟』堡!i塑：旦!!!坐坠竺!!：!!!!：∑!!：!!：堕!：堑碳青霉烯类抗生素耐药K1型肺炎克雷伯菌一株的分离及耐药机制分析张嵘王选吕建新【摘要】目的对临床分离的1株碳青霉烯类抗生素耐药K1型肺炎克雷伯菌进行毒力及耐药机制分析。方法采用Vitek2Compact全自动微生物鉴定仪对细菌进行鉴定；浓度梯度法(E-test)测定细菌对临床常用抗生素的最低抑菌浓度(MIC)；乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验和改良Hodge试验分别检测金属酶和碳青霉

2、烯酶；聚合酶链反应(PCR)扩增毒力基因K1、K2、K5、K20、K54、K57、rmpA、magA、wcaG和13内酰胺类抗生素耐药基因；接合试验检测耐药基因和毒力基因是否存在于质粒上；接合子质粒进行PBRT质粒分型；多位点序列分析(MLST)对该菌株进行分子分型。结果药敏结果显示该菌株对临床常用的头孢类和碳青霉烯类抗生素耐药；EDTA协同试验和改良Hodge试验显示该菌株产碳青霉烯酶，不含金属酶；PCR扩增及序列分析发现该菌株携带耐药基因blaKPC一2、blaCTX—M．15、6fⅡ帆M-1、blaSHV一1，同时

3、有毒力基因K1、moga、rmpA、wcaG；能通过接合试验将碳青霉烯耐药基因传递到大肠埃希菌EC600，接合子未发现毒力基因存在；PBRT质粒分型为Frep型质粒；MLST分型为ST23型。结论产毒力基因的K1型肺炎克雷伯菌携带blaKPC-2碳青霉烯耐药基因，该耐药基因可以通过质粒发生转移。【关键词】克雷伯菌，肺炎；毒力因子类；抗菌药Isolationofacarbapenem-resistantK1serotypeKlebsieUapneumoniastrainandthestudyofresistancemech

4、anismZhang舶增，WangXuan，如JianxiraSchoolofLaboratoryMedicineand￡扣Science，WenzhouMedicalUniversity，Wenzhou325035，ChinaCorrespondingauthor：眈Jianxin，Email：brigitte_zx@163．com【Abstract】0bjectiveTostudythevirulenceandmechanismofcarbapenemresistanceofaclinicalisolateofcar

5、bapenem·resistantK1serotypeKlebsiellapneumoniastrain．MethodsIdentificationofisolatewascarriedoutwithVITEK-2compactsystem．AntimicrobialsusceptibilitywasdeterminedbyE·test；MetalloB—lactamasesandcarbapenemasesscreeningwereconductedbyimipenem—EDTAdoublediscsynergytes

6、tandmodifiedHodgetest，respectively．Specificpolymerehsechainreaction(PCR)andDNAsequencingwerepreformedtodetectthevirulencegenesincludingKI，I(2，K5，K20，K54，K57，，№gA，rmpA，wcaGandaseriesofB—lactamaseresistencegenes．Conjunctionexperimentwasalsoperformed．Theplasmidsoftr

7、ansconjugantsweresubmittedtoPCR—basedreplicontyping(PBRT)method．Moleculartypingwasperformedbymultilocussequencetyping(MIST)．ResultsAntimicrobialsusceptibilitytestingrevealedthattheKlebsiellapneumoniastrainwasresistanttomostoftheantibioticsusedinclinic．Phynotypeeo

8、nfirmaryrestrevealedtheproductionofcarbapanemases，whileMetalloB—lactamaseswerenegative；PCRandDNAsequencingconfirmedtheisolatewaspositiveforblaKPC-2，blaCTX—M一15