构树体细胞胚悬浮培养关键技术研究.pdf

《构树体细胞胚悬浮培养关键技术研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、＇＇＇＇‘乃＇、＂．＾一？．…．—二心茲三、！．片巧苗琴三如＊产二三；皆碱梯六足令：／；＇（、、知＇爭乂终‘’＾＿—公妃‘产ｋ；ｉ‘＇’’、‘‘：：．別；地ＶＡ垂私化码；ｉ〇ｌ化Ｖ分类号Ｑ．／冷．／於ｆｐ巧’’、■，．’■－－’．壑公开Ｘ－．７巧：．．ＶＡ学％：ｔ３］〇７１〇〇〇〇２ｆｅ、兴，；；、、寒，、－－＇产？、、、．．、、己、１、＇、．？衣，？＇、产方山、—护？、＇＇’Ｌ：－、＇．－、二＇Ｗ－、．ｔ．雌把，／ＶＸ参ｔ耗’？、＾、１、入’巧＾巧化－、’７扛０貧疋、＇一是、谋瑣．、‘、＇

2、巧辦、’＇－、’－，．－．乃式‘．，－：片’？兰＞成、：分叫蔡巧，气＾：；／ｖ薄嶺．、．：＇－．＇：芯：＾．镇為岭、識話病Ｖｎ５丰金Ｘ典火＃．：＾＾繞：麵謹觀議難職论襄文琴—＇＂—＂＇—＇３常‘々：－．．潘喊＾姆．；；＿ｒ／岭心鄭，，与边扛＇終．、—、、一‘气、乐；已峡、；：：、ｒ：掉铅；窄ｒ乃；譯．扛冷：题目＞构滅蜘胞胚悬浮培养关键技术炒巧懲巧’’．？？＇ｃ，＇ｉｔｉｅｍｒ；ｂｏ、＾‘Ｓｔｕｄｏｎｋｅ化ｃｈｎｏｌｏ巧ｏｆｓｏｍａ、ｓ，？－二英文题自；ｙ，．ｙｙｇ＇，心，、、’、、‘＊‘、－’＇‘；－ｆ＾

3、、ｒｅｏｆｉｏｕ化ｏｎｅｔｉａｒｉａｕｅｎｓｉｏ打ｃｕｌｔｕＢ．ｓｓ巧Ｖ＇ｐ巧ｙｐ六早、‘‘、、＊乂‘乃、‘＇‘、。’＾ｗ与产试冷‘；考１撫啡＼冷＾、、、，＇’，＇、生物子‘ｒ称：占学科名‘；‘‘，＊；＇，皆、擊＜？皆苗冷／苗、？．；，烏学院Ｔ生物工程Ｐ竞Ｖ案学萨違：，、‘■＇，■一－＊＂＊■＞？＞？．…．＇；，、，占；、．个；？ｉ，ｉＡ？、‘、＇、’、＇‘？１＇任女、；＇、、－．、；別开；；张朝呼．巧％生三；黄苗济．个．黄、？‘＇、‘－、‘？？、＂、八，‘－＊—、＼為；一ｖ＼’巧：；：＼；＼＼；為：＼

4、，、、碱ｆ的骄今於、７＾、’、＇片才－乂、．－＊？记忠畔＾乂辩ｖ，為斯Ｕ＇．非■—Ｖ＾广人、‘－＇Ｌ＾二．八，＿＇；衣、、ｖＶ、＇．＾？、．畔％－＞又Ｙ．、今雜心＇、，’、’’护＊、？、－．＊＊＞八、、一冷ＸＡ＞立户咕滯、／、Ｖ公？；／。＇、－＇、Ｗ－－一片取：户护心愚秦ｔ一－＇．＇’乂’’、＇、＇＞、’，－、价心、片Ｖ．、＇子一ｉｗｗ：啦．ｉ／Ｌ节私＞＾；分类号：Q945.51单位代码：10152密级：公开学号：13107100002037大连工业大学硕士学位论文中文题目：构树体细胞胚悬浮培养关键技术研究英文题

5、目：StudyonkeytechnologiesofsomaticembryosuspensioncultureofBroussonetiapapyrifera学科名称：生物学隶属学院：生物工程学院研究生：张朝晖指导教师：张宗申教授2016年4月摘要摘要本研究以杂交构树为实验材料，建立通过愈伤组织制备体细胞胚的技术途径。通过构建细胞悬浮培养动力学模型，建立稳定的构树细胞悬浮培养体系。同时研究了体细胞胚诱导的关键影响因素。主要结果如下：（1）构树愈伤组织诱导过程中，选用叶片作为诱导材料时愈伤组织的诱导率最高且诱导得到的愈伤组织细胞的生长状态最佳。最佳培养基为：MS+1.0m

6、g/L6-BA+2.0mg/L2,4-D，诱导率达到96.55%。（2）愈伤组织于固体MS培养基上经过20d继代培养，于1.0mg/L6-BA+0.5mg/L2,4-D的激素组合试验组中表现出最佳继代增殖效果。（3）构树愈伤组织的细胞悬浮培养出现典型的“S”型，愈伤组织于13d的增殖倍率为4.32，13d之后生长速度逐渐变缓，从第19d开始进入生长停滞期。（4）构树细胞悬浮培养的激素组合优化试验中，6-BA的质量浓度在激素组合中具有极显著性，生长素2,4-D的质量浓度及细胞分裂素KT质量浓度对悬浮培养的结果有显著影响。优化结果显示，最佳的悬浮培养激素组合配比为：1.0mg

7、/L6-BA+0.5mg/L2,4-D+0.4mg/LKT+0.4mg/LNAA。（5）选择在4g鲜重接种量及50ml液体培养基的组合条件下，愈伤组织的增殖效果最佳。（6）细胞悬浮培养动力学模型建立的试验中，通过响应面试验分析得出，鲜重比Y=+5.72-0.48A+0.067B-0.079C-0.85D-0.1AB-0.27AC-0.21AD-1.09BC+0.05BD+0.038CD-1.05A2-1.02B2-0.50C2-0.24D2，其中A因素（摇床转速）和D因素（碳源浓度）在方程具有极显著影响，B因素（温度）和C因素