蓖麻细胞悬浮培养技术研究

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1、萬麻细胞悬浮培养技术研究薑麻细胞悬浮培养技术研究摘耍:生长在大冶市铜绿山矿区的野生亀麻(RicinuscommunisL.)是一种新发现的铜超富集植物。为了建立稳定、快速生长的萬麻悬浮细胞系,以便筛选重金属抗性蒐麻细胞和培育超富集植株,以前期诱导的薑麻胚性愈伤组织为材料,通过正交试验设计,优化悬浮细胞系的培养条件,建立匏麻细胞悬浮系,并在优化条件下测定细胞的生长曲线和培养液pH变化。结果表明,关键词:菴麻(RicinuscommunisL.);胚性愈伤组织;正交试验设计;悬浮细胞系中图分类号:S565.6文献标识码文

2、章编号:0439-8114(2014)04-0932-04TheCellSuspensionCultureofRicinuscommunisL.KANGWeil,ZHENGJinl,2(1.HubeiPolytechnicofUniversity,Huangshi435003,Hubei,China;2.HubeiKeyLaboratoryofMineEnvironmentalPollutionControl&Remediation,Huangshi435003,Hubei,China)Abstract:Ricinu

3、scommuniswasanewhyperaccumulatorgrowingonTonglushancoppermineinDayecity・AstableandrapidgrowthcellsuspensionculturelineofR.communiswasestablishedtoscreenheavy-resistancecellandaccumulateplantsusingembyrogeniccelluswithorthogonalexperimentaldesigri.Theresultsshow

4、edthattheoptimalculturingconditionswereMSmediumwith0.5mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+50mg/Lsucrose+350mg/Lcaseinhydrolyzateand2.0g(FW)/50mLinoculationquantity,culturetemperature(26+2)°C,drakculture,110r/min.Thebestgrowthrateofthecellswere4.58g/(50mL•14d)and0.49g/(50mL•16d

5、)undertheoptimalconditions,respectively.ThegrowingcurvesofR.communissuspensioncellshapedby“S”nearly.Thecultutringperiodwas16dwiththerapidgrowthphasefrom6to14d.ThepHtrendofcultureliquidwasdeclinedfirstandthenincreasedtostablegraduallyduringaculturingperiod・Keywo

6、rds:RicinuscommunisL;embyrogeniccellus;orthogonalexperimentaldesign;suspensioncellline蒐麻(RicinuscommunisL.)属于大戟科(Euphorbiaceae)M麻属(Ricinus),在我国各地均有分布,是一种常见的特种油料作物,经济价值较高[1]。近年來,蒐麻在植物修复重金属污染环境方面的作用引起人们的关注。研究报道在液体培养和盆栽条件下,蒐麻幼苗对水体和土壤铜的吸收都达到超富集水平[2,3];篦麻在重度锌污染的土壤中仍

7、然生长较好,表现出较强的耐受性[4,5];蒐麻叶片可吸收大气中的二氧化硫、二氧化碳,通过种植麓麻可以减轻大气污染[6]。笔者前期研究证实,在大冶市铜绿山矿区自然散生的野牛篦麻,不仅对土壤铜污染具有较强的耐受性,而且体内能够富集较多的铜,具有铜超积累植物的特征,在修复铜污染土壤中具有较大的潜力[7,8]0但是,由于长期处在重金属污染严重的土壤环境下,与栽培超麻的农艺性状相比,这些矿山蒐麻大多株形偏小,结实率低,了粒较小,制约了蒐麻在植物修复工程中的应用,需要通过遗传改良加以克服。目前,生物技术在植物育种中的应用十分广泛

8、,通过生物技术与传统育种的结合,不仅克服了传统杂交育种周期较长、效率较低的不足,而且大大提高了育种效率,成为农业科技创新的重要战略[9]。本研究以前期诱导的萬麻胚性愈伤组织为材料,釆用细胞悬浮培养法建立施麻悬浮细胞系,为筛选重金属抗性蒐麻细胞和培育超富集植株提供基础数据。1材料与方法1.1试验材料试验所用蒐麻胚性愈伤组织由湖北理工学院生物工程实

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