杂交构树体细胞胚诱导及人工种子的制备

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2、靜ｐ；游誦ＨＵ、指导教师；张别麗桥議礙碱心，讓鑛謎纖麵，耀皆寒卷議雜議ｉ難變觀難魏、学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除文中己经法明引用的内容外，本论文不含其他个人或其他机构已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究作出重要贡款的个人和集体，均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学生签名：李毒杉关于硕±学位论文使用授权的说明论文题目：杂巧构树体细胞胚诱导及人工种子的制备本学位论文作者完全了解大连工业大学有关保留、使用学位论文的规磁定，大连工业大学有权保留并向国家有关部口

3、或机构送交论文的复印件和盘，允许论文被查阅和借阅，可１＾将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学一位论文，并且本人电子文档的内容和纸质论文的内容相致。保密的学位论文在解密后也遵守此规定。是否保密（＆）。学生签名；寺身喪导师签名：＾年／月若日分类号：Q945.51单位代码：10152密级：公开学号：12107100002029大连工业大学硕士学位论文中文题目：杂交构树体细胞胚诱导及人工种子的制备英文题目：SomaticembryoinductionoftheBroussonetiaapandartific

4、ialseedpreparation学科名称：生物学隶属学院：生物工程学院研究生：李毅指导教师：张宗申教授2015年5月摘要摘要构树是桑科构树属落叶乔木，它是优质的造纸原料和降糖的药用植物，还可以用于饲料以及园艺绿化等方面。目前，构树的主要繁殖方式是用种子繁殖或扦插繁殖。由于构树种子的种壳较坚硬吸水困难，不易萌发；扦插方式占用土地、效率低、成本高以及受季节限制等。因此，通过植物器官组织诱导愈伤中获得的体细胞胚规模化培养，然后获得人工种子，对于规模化繁育构树种苗具有重要的意义。本研究的材料是通过航天育种途径获得的优质杂交构树树种，通过愈伤组织、胚性细胞、体细胞胚诱导及悬浮培养等，获得高活性的

5、体细胞胚，并制作构树人工种子。主要研究了激素等因素对体细胞胚诱导的影响，主要结果如下：1.构树幼嫩叶片在只含2,4-D0.5mg/L的MS培养基中7d左右出现愈伤且诱导率最高，诱导率可达93%。构树幼嫩叶片在同时含有2,4-D和6-BA两种激素的MS培养基中很难出现愈伤，只有叶片面积的增大，而且8d左右时褐化作用明显；2.愈伤组织继代时使用2,4-D0.2mg/L的MS培养基，愈伤生长旺盛，松散，淡黄色。在光照下培养12h/d，可以有效避免愈伤木质化的产生。低于这个浓度很容易出现根的分化，伴有褐化现象；3.建立悬浮细胞培养体系，测定出在使用6-BA1.5mg/L，NAA0.5mg/L的MS

6、液体培养基时，诱导率最高，生长势最好；4.杂交构树愈伤组织在激素为6-BA2.0mg/L，NAA1.0mg/L的MS培养基中，体细胞胚的胚胎发生效率最高，可达到17.9％；5.在海藻酸钠中加入MS培养基和2.0mg/L6-BA和20g/L蔗糖制备成的人工种子萌发率最高，可达33.3％。关键词：构树；体细胞胚诱导；细胞悬浮培养体系；人工种子IIAbstractAbstractBroussonetiapapyriferaisonekindofdeciduoustrees,familyMoraceae.Therefore,B.papyriferahasbeenusedasrawmaterialo

7、fhigh-gradepapermakingandassucrose-decreasingherbs;inaddition,itcouldbeusedasrawmaterialoffeedsandplantspeciesforbarrenmountainsafforesting.Currently,themajorpathwaytoproduceBroussonetiapapyriferaseedlingswasthro