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《2017-18学年高中生物专题5DNA和蛋白质技术5.2多聚酶链式反应扩增DNA片段练习.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段基础巩固1有关PCR技术,下列叙述不正确的是( )A.用于PCR的引物长度通常为20~30个核苷酸B.在用PCR技术扩增DNA时,DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似C.PCR反应只需一定的缓冲溶液和DNA模板以及四种脱氧核苷酸D.PCR一般经历三十多次循环,每次循环分为变性、复性、延伸解析:PCR反应中需要的条件有模板(DNA分子)、原料(四种脱氧核苷酸)、酶(耐高温的TaqDNA聚合酶)、引物(小片段单链DNA或RNA)和一定的缓冲液等。答案:C2标准的PCR过程一般分为变性、复性、延
2、伸三大步,这三大步需要的温度依次是( )A.95℃、55℃、72℃B.72℃、55℃、95℃C.55℃、95℃、72℃D.80℃、55℃、72℃解析:当温度上升到90℃(90~96℃)以上时,双链DNA解聚为单链,称之为变性;当温度下降到50℃左右(40~60℃)时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合;当温度上升到72℃左右(70~75℃)时,溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在耐高温DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链,称为延伸。答案:A3使用PCR仪进行DNA扩增的具体实验操作顺序应为(
3、 )①设计好PCR仪的循环程序 ②按配方准备好各组分③用微量移液器在微量离心管中依次加入各组分 ④进行PCR反应 ⑤离心使反应液集中在离心管底部A.②③⑤④① B.①⑤③④②C.②③⑤①④D.④②⑤③①解析:使用PCR仪进行DNA扩增时,首先按照PCR体系配方,依次将各组分加入微量离心管,离心使反应液集中于试管底部,然后再设计好PCR仪的循环程序进行PCR反应。答案:C4利用PCR技术扩增目的基因的过程中,需加入( )A.耐高温的解旋酶以保证DNA双链完全解开B.2种已知核苷酸序列的引物以保证核苷酸链的延伸C.4种足
4、量的核糖核苷酸以保证目的基因的扩增D.一定量的盐酸和氢氧化钠溶液以维持pH的稳定解析:在PCR过程中解旋是通过加热反应液到90℃6实现的,不需要加入解旋酶;PCR过程中以解开的DNA的两条链为模板,因此需要2种已知序列的引物分别与两条模板链结合(注意由于DNA分子的两条链是反向的,2种引物会分别在DNA的两端与互补的模板链结合);PCR的原料是4种脱氧核苷酸;反应溶液体系的pH依靠缓冲液维持稳定。答案:B5在PCR实验操作中,下列说法不正确的是( )A.在微量离心管中添加各种试剂时,只需一个枪头B.离心管的盖子一定要盖严,防止液
5、体外溢C.用手轻弹离心管壁的目的是使反应液充分混合D.离心的目的是使反应液集中在离心管底部,提高反应效果解析:在微量离心管中添加各种试剂时,每吸取一种试剂后,移液器上的枪头必须更换,以确保实验的准确性;离心管的盖子一定要盖严,防止实验中脱落或液体外溢;离心的目的是使反应液集中在离心管底部,提高反应效果。答案:A6DNA的复制需要引物,其主要原因是( )A.可加快DNA的复制速度B.引物可与DNA母链通过碱基互补配对结合C.引物的5'端有助于DNA聚合酶延伸DNA链D.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从3'端延伸DNA链解
6、析:DNA的两条链是反向平行的,为了明确地表示DNA的方向,通常将DNA的羟基(—OH)末端称为3'端,而磷酸基团的末端称为5'端。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3'端延伸DNA链,因此,DNA复制需要引物。当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的3'端开始延伸DNA链,因此DNA的合成方向总是从子链的5'端向3'端延伸。答案:D7变性作用是指核酸双螺旋结构被破坏,双链解开,但共价键并未断裂。引起变性的因素很多,升高温度、过酸、过碱以及加入变性剂等都能造成核酸变性。PCR的反应过程中,引起D
7、NA变性的因素是( )A.pH过高B.pH过低C.升高温度D.加入酒精解析:各选项的条件均能导致DNA分子变性,但在PCR反应中,变性后还要进行复制和延伸等过程,过酸、过碱、酒精等能够导致反应过程中的酶变性失活,使DNA扩增不能进行,而PCR反应中的DNA聚合酶是耐热的,所以可选用升高温度使DNA变性。答案:C8PCR技术扩增DNA的过程中,DNA片段经若干次扩增后,与其数目的理论值变化相符的图是( )解析:PCR反应中DNA的扩增与体内DNA复制是类似的,即1个DNA分子复制1次,产生2个DNA分子,复制2次产生4个DNA分
8、子,呈指数扩增。1个DNA分子,经过n次复制后得到的DNA分子数量为2n,与C项曲线相符。6答案:C9随着研究的不断深入,PCR方法被不断改进。目前它从一种定性的分析方法发展到定量测定;从原先只能扩增几个kb(千碱基对)的基因发展到已能扩增长达几十
