课题3　分解纤维素的微生物的分离 (3).ppt

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1、学习目标：学会分离土壤中能分解纤维素的微生物的方法课题3分解纤维素的微生物的分离纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。草食性动物是怎样消化食物中纤维素的？胃和肠道中生活着大量分解纤维素的微生物，能产生纤维素酶，将纤维素分解成葡萄糖。课题背景棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物，纤维素的分解需要在纤维素酶的催化作用下完成，请完成下列过程（阅读课本第二段）：（一）纤维素与纤维素酶基础知识纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX

2、酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维素纤维二糖葡萄糖C1酶Cx酶葡萄糖苷酶体会纤维素酶作用的实验：（二）纤维素分解菌的筛选1、筛选纤维素分解菌的方法是______________。该方法可以通过________反应直接筛选。刚果红染色法颜色2、其原理是：刚果红可以与纤维素形成____________，当纤维素被_________分解后，红色复合物无法形成，出现以_____________为中心的________，我们可以通过____________来筛选纤维素分解菌。红色复合物纤维素酶纤维素分解菌透明

3、圈是否产生透明圈练一练：1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是A.纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B.纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C.纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D.葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖2.利用刚果红染色法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是A.刚果红能与纤维素形成红色复合物B.刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C.刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D.若培养基上产生了透明圈，则说明已筛　选出了纤维素分解菌土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落（操作流程）（此步可省略）实验设计〖旁栏思考

4、题〗本实验流程与课题2中的实验流程有哪些异同？课题2——土壤取样制成悬液，直接稀释涂布在选择培养基上课题3——土壤取样，选择培养，增加纤维素分解菌浓度后，再稀释涂布纤维素分解菌大多分布在____________的环境中。采集土样时，应选择富含纤维素的环境。如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等等。也可将滤纸埋在土壤中一个月左右，这样会有能分解纤维素的微生物生长。【资料一】土壤取样富含纤维素〖旁栏思考题〗为什么要在富含纤维素的环境中找纤维素分解菌？在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高〖旁栏思考题〗将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认

5、为滤纸应该埋进土壤多深？使纤维素分解菌相对聚集。将纸埋于深约10cm的腐殖土壤中。1、纤维素分解菌选择培养基属于______（固体、液体）培养基，原因是____________________。【资料二】选择培养阅读资料二“选择培养基”，回答以下几个问题：液体没有添加琼脂（凝固剂）2、该培养基对微生物________（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是_______________________________________________________。以纤维素粉为唯一碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖具有可选用牛肉膏蛋白胨

6、培养基作为对照。3、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？〖思考2〗实验流程中“选择培养”的目的是什么？其目的是增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。【资料三】刚果红染色法方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应方法二：在倒平板时就加入刚果红染色法优点缺点方法一（后加刚果红）方法二（先加刚果红）颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作繁琐，刚果红会使菌落之间发生混杂操作简便，不存在菌落混杂问题有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。思考：这两种方法各有哪些优点与不足方法一中NaCl溶液的作用？洗去浮色类似的操作

7、还出现在什么实验中？选择培养的操作方法将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下振荡培养1～2天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养。思考：据“摇床”、“振荡”分析纤维素分解菌的异化作用类型？操作提示结果分析与评价1、选取的实验样品是什么？取样的环境有哪些特点？理由？2、培养基是否有杂菌污染？是否分离得到了目的菌株？3、分析结果不同的原因。为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_____________实验，纤维素酶的发酵方法有______发酵和______发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素

8、所产生的________含量进行定量测定。发酵产纤维素酶液体固体葡萄糖课题延伸D1、下列材料中纤维素含量最高的是()A．杨