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时间：2020-01-23
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1、双向免疫扩散试验2009.11.3指可溶性抗原与相应抗体在琼脂介质中相互扩散，彼此相遇，在比例适当处形成沉淀线。根据沉淀线的有无、形状和位置对抗原或抗体进行定性分析，也可用于抗体的半定量检测本次实验利用此原理进行抗体效价的测定。实验原理2009.11.32009.11.3抗体：抗IgG抗原：IgG巴比妥缓冲液1.5％琼脂（巴比妥缓冲液配制）载玻片、打孔器、微量进样器37℃水浴箱主要的试剂和器材2009.11.3制板用移液管吸取4-4.5ml的琼脂，将其放到水平放置的载玻片上，待冷凝。打孔打梅花孔，各孔间的距离为0
2、.7-0.8cm。实验步骤12009.11.3倍比稀释抗体（见下表）加样用微量进样器在各孔加样品10ul，中央孔加抗原，周围6孔分别加不同稀释度的抗体将玻片放在湿盒中，37℃18-24h123456生理盐水2525252525抗IgG5025252525252009.11.3在抗原和抗体孔之间会看到白色的沉淀线。实验结果2009.11.3将出现白色沉淀线的最高血清稀释度作为该抗体的效价。例：该血清中抗IgG抗体的效价为1：4。实验结论画出实验结果图并判断效价2009.11.3玻片要清洁，边缘无破损。浇制琼脂板时要
3、均匀、无气泡。孔要打得圆整光滑，边缘不要破裂。加样时应尽量避免气泡或加到孔外，以保证结果的准确性。注意微量进样器每加一个样品之后，就得清洗。注意事项2009.11.3
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