第六章 第二节 食品中致病球菌的检验1.ppt

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1、第六章食品中病原菌的检验第四节金黄葡萄球菌及其检验金黄色葡萄球菌及其检验金黄色葡萄球菌属于微球菌科葡萄球菌属,金黄色葡萄球菌是该属中的一个种.引起人类疾病的葡萄球菌主要是金黄色葡萄球菌,除可引起皮肤组织炎症外,还可产生肠毒素.如果该菌在食品中大量生长繁殖,产生毒素,人误食了含有毒素的食品,就会发生食物中毒,因此,由该菌引起的中毒为毒素型食物中毒.食品中存在金黄色葡萄球菌对人的健康是一种潜在威胁,所以检验食品中的金黄葡萄球菌及数量具有实际意义.主要内容一、金黄色葡萄球菌的生物学特性二、金黄色葡萄球菌的检验一、金黄色葡萄球菌

2、的生物学特性1、形态与染色2.分型简介3、培养特性4.生化特性5.毒素与酶6.抵抗力7.致病性1、形态与染色：(staphylococcusaureus)典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜。革兰氏染色阳性。典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8mm左右，显微镜下排列成葡萄串状。葡萄球菌革兰染色镜下图金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片金黄色葡萄球菌的透射电镜照片2.分型简介血清学分型：金黄色葡萄球菌水解，获得两种抗原成分：蛋白抗原和多糖抗原蛋白抗原主要

3、为葡萄球菌A蛋白（SPA)，是一种表面抗原，90%以上金黄色葡萄球菌有此抗原，无特异性。多糖抗原为半抗原，有型特异性。菌体分型据肠毒素分型据血浆凝固酶分型3、培养特性金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C,最适生长pH7.4。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15%NaCl肉汤中生长。在肉汤培养基中生长迅速，37℃,培养后24h,呈均匀浑浊生长,延长培养时间,管底出现少量沉淀,轻轻振摇,沉淀物上升,旋即消散,培养2-3d后可形成很薄的菌环,在管底则形成多量粘稠沉淀。

4、3、培养特性葡萄球菌在普通营养琼脂平板上培养24-48h后,可形成圆形凸起、边沿整齐、表面光滑、湿润、有光泽、不透明的菌落，直径1-2mm。可产生不同的色素。如金黄、柠檬，色素为脂溶性，不溶于水，故色素只限于培养物，而不外渗至培养基中。金黄色葡萄球菌在血平板上形成的菌落较大，多数致病菌株可产生溶血毒素，菌落周围形成透明的溶血圈(β溶血圈)，非致病性球菌则无此现象。金黄色葡萄球菌的平板菌落照片（普通培养基）4.生化特性萄球菌大多数菌株可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。病菌株多，能分解甘露醇产酸。基红反应阳性，

5、VP反应弱阳性。多菌株可分解精氨酸，水解尿素产氨，还原硝酸盐，液化明胶。黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。金黄色葡萄球菌在甘露醇盐平板上的菌落金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶。产生的毒素和酶主要有下列几种：（1）溶血毒素：外毒素，可使动物红细胞溶解，培养时出现溶血环。按抗原性不同，至少有α、β、γ、δ、ε五种，对人类致病作用的主要是α溶血素。α溶血素是一种外毒素，具有良好的抗原性。经甲醛处理可制成类毒素。5.毒素与酶5.毒素与酶（2）杀白细胞素：使

6、寄主白细胞崩解死亡，是一种毒性蛋白。（能杀死人和兔的多形核粒细胞和巨噬细胞。此毒素有抗原性，不耐热，产生的抗体能阻止葡萄球菌感染的复发。）（3）肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A、B、C1、C2、D、E及F六种血清型。该毒素为一种可溶性蛋白质，耐热，100℃30分钟不破坏。肠毒素可引起急性胃肠炎即食物中毒，以A型引起的食物中毒最多。5.毒素与酶5.毒素与酶(4）血浆凝固酶：血液凝固的本质是血浆内的可溶性纤维蛋白原转变为不溶解的纤维蛋白.正常人体在钙离子的参与下凝血酶原转变为凝血酶.在血

7、液中加入枸橼酸钠,可与血浆中的钙离子结合成不解离的枸橼酸钙,凝血酶不能形成,血凝的化学反应不能进行.血浆凝固酶是能使含有枸椽酸钠或肝素抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质，致病菌株多能产生，如金黄葡萄球菌。常作为鉴别葡萄球菌有无致病性的重要标志。当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。同时，凝固酶集聚在菌体四周，亦能保护病菌不受血清中杀菌物质的作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关。（5）溶纤维蛋白酶可使人及家兔、犬的已凝固的纤维蛋白溶解。溶纤维蛋白酶是一

8、种激酶，可激活血浆蛋白酶原成为血浆蛋白酶而使纤维蛋白溶解。初次培养后，菌落周围若出现一个不透明圈，表示产生凝固酶；继续培养时，不透明圈消失，说明是溶纤维蛋白酶作用的结果。（6）透明质酸酶透明质酸酶具有高度的粘稠性，是机体结缔组织中基质的主要成分。它被透明质酸酶水解后，结缔组织细胞间失去粘性呈疏松状态，有利于细菌和毒素