分子生物学复习资料.doc

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1、分子生物学复习资料第二章基因：是DNA或RNA中具有遗传效应的一段核苷酸序列，是遗传的基本单位和突变单位以及控制性状的功能单位；简单来说，基因是具有遗传效应的DNA片段，是控制生物性状的基本遗传单位。DNA的一级结构：是指四种脱氧核苷酸的排列顺序，又称为核苷酸序列或碱基顺序。DNA的一级结构决定着基因的功能。DNA双螺旋的结构特点：（1）双螺旋中存在大沟和小沟 ；（2）碱基顶部基团裸露在DNA大沟内 ；（3）蛋白质因子与DNA的特异结合依赖于氨基酸与DNA间的氢键的形成；（4）蛋白质因子沿大沟与DNA形成专一性结合的机率与多样性高于沿小沟的结合；（5）大沟的空间更有利

2、于与蛋白质的结合；（6）每一条单链具有5′3′极性；两条单链间以氢键连接；两条单链极性相反，反向平行；以中心为轴，向右盘旋(B-DNA)。DNA分子变性：天然存在的双链DNA具有规则的双螺旋结构，当DNA被加热或在某些试剂的作用下，配对碱基之间氢键和相邻碱基之间的堆集力就会受到破坏，逐步变为近似于无规则的线团构型的单链变性DNA。这种由双螺旋结构状态转变成单链无规线团状态的过程叫作DNA变性，也称熔解。变性过程的表现：☆单链DNA粘度降低☆单链DNA沉降速度加快☆单链DNA分子的A260nmUV吸收值上升(碱基序列被打乱)影响DNA复性过程的因素：（1）阳离子浓度（2

3、）复性反应的温度Tm-25℃(60-65℃)（3）单链DNA分子的长度（4）单链DNA的初始浓度C0（5）DNA分子中核苷酸的排列状况（随机排列，重复排列）经典的基因概念：（1）基因是染色体上的实体；（2）基因象链珠一样，孤立地呈线状地排列在染色体上；（3）基因是功能、突变、交换、“三位一体”的最小的不可分割的基本的遗传单位；顺式作用因子：存在于基因序列旁侧能影响基因表达的序列。包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等，作用是参与基因表达的调控。顺式作用元件本身不编码任何蛋白质，仅提供一个作用位点，要与反式作用因子相互作用而起作用。通过核苷酸自身的特异二级结构控制与

4、它紧密连锁的结构基因的表达反式作用元件：是能直接或间接地识别或结合在顺式作用因子核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。有时也称转录因子。大多数真核转录调节因子由某一基因表达后，可通过另一基因的特异的顺式作用因子相互作用，从而激活另一基因的转录。通过扩散自身表达产物（酶，调节蛋白）控制其他基因的表达。可转录，可翻译调节蛋白的DNA功能区。可通过互补测验体系确定其功能区域。重复基因概念：重复基因指染色体上存在多数拷贝基因，重复基因往往是生命活动最基本，最重要的功能相关的基因。重叠基因的概念：两个或两个以上的基因共有一段DNA序列，或者是指一段DNA序列成为两个以上基因

5、的组成部分。重叠基因有多种重叠方式。极性突变的基本概念：在一个操纵子中，与操纵基因毗连的结构基因发生终止突变后，它除了影响该基因本身产物的翻译外，还影响其后结构基因多肽的翻译，并且具有极性梯度的特征。断裂基因（真核生物所特有的）：真核生物中基因具有不连续性，即一个基因的编码序列往往被一些非编码序列分隔开。基因中能够转录并进一步编码多肽链合成的部分称为外显子，而在转录后会被剪除的部分则称为内含子。原核生物复制方向：单起点，双方向；真核生物复制方向：多起点，双方向；DNA双螺旋有A、B、Z型，天然状态下的DNA的分子构象主要以B-DNA为主；钠离子浓度大的时候主要以Z-D

6、NA、A-DNA为主。第三章DNA复制：亲代双链DNA分子在DNA聚合酶的作用下，分别以每单链DNA分子为模板，聚合与自身碱基可以互补配对的游离的dNTP,合成出两条与亲代DNA分子完全相同的子代DNA分子的过程。复制子：一个DNA起点所控制的DNA序列为复制子，即复制起点，原核生物的复制子通常为一个，而真核生物的复制子则为多个。复制体：是在复制叉组装的蛋白质复合体，负责DNA的合成。包括DNA聚合酶、引发体、SSB、解旋体等。DNA复制的五个特点：（1）有一定的复制起始点（2）半保留复制（3）需要引物（4）双向复制（5）半不连续复制DNA的呼吸现象：DNA复制原点处

7、氢键迅速断裂与再生，导致两条DNA链不断解裂与聚合，形成瞬间的单泡状结构的过程（在富含AT区域尤为明显）。DNA复制的“呼吸现象”常温下，活体内双链DNA分子中富含AT的变性核心区（启动子、终止子区）常表现氢键的断裂与形成的“DNA呼吸现象”。这对于某些特殊的蛋白质与DNA结合并阅读链内信息具有重要作用。请简述真核生物DNA复制时是如何避免5’末端短缩的。（20分）端粒酶（TTGGGG）与染色体DNA末端的3’单链区域结合（5’末端短缩后，留下3’游离的单链末端），端粒酶中的RNA与DNA配对，并以CCCCAA序列为模板，以DNA的3’-OH为引物，