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时间:2020-01-17
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1、酸性磷酸酶(ACP)的显示目的要求基本原理实验用品方法与步骤实验结果实验报告…………..,,,,,,,,,…….…….,,,,,,..,,.,kl;目的要求1.熟悉酸性磷酸酶显示方法的原理及操作步骤2.观察酸性磷酸酶在细胞中的分布ACP在酸性条件下(pH4.7)可使作用液中的底物β-甘油磷酸钠的磷酸根解离出来,进而与溶液中硝酸铅结合形成磷酸铅沉淀,因其是难溶解的无色沉淀物,需要与黄色的硫化铵作用,生成棕黑色PbS沉淀而被显示出来。β-甘油磷酸钠甘油+PO3-PO4+Pb(NO3)2Pb2(PO4)2Pb2(PO4)
2、4+(NH4)2SPbS基本原理实验用品1.器材:注射器、解剖用具、恒温水浴锅、载玻片、盖玻片2.试剂:3%淀粉溶液;ACP作用液;2%硫化铵3.材料:小鼠腹腔液涂片免疫动物:实验前4~6天用无菌注射器取已灭菌的3%淀粉溶液1ml注射于小鼠腹腔内,每天一次。颈椎脱臼处死小鼠吸取少量腹腔液,在玻片上涂层一薄层,室温晾干。将涂片插入装有ACP作用液的染色缸中,37℃作用30分钟。取出后,蒸馏水漂洗。用10%甲醛钙溶液后固定5min。玻片入2%硫化胺溶液作用2~3min,进行显色。取出后蒸馏水漂洗,镜检。对照实验对照组
3、的作用液中不加β-甘油磷酸钠,而以蒸馏水代替;或入作用液前先用高温(50)处理30min,使酶失去活性,作好标记,然后同时进行上述实验。实验结果实验报告绘图表示酸性磷酸酶在细胞中的分布情况;说明阴性对照在实验中的作用。
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