【生物工程专业】【毕业设计】多酚氧化酶活性测定及控制

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1、（20届）毕业论文多酚氧化酶活性测定及控制　　II摘要：研究抑制多酚氧化酶(PPO)活性的方法，为莲藕保鲜过程中控制褐变提供理论依据。试验研究了温度、pH值、底物浓度以及抑制剂对莲藕多酚氧化酶(PPO)的影响。结果表明：莲藕PPO最适pH值为7.5，最适温度为35℃。亚硫酸钠、抗坏血酸(Vc)对莲藕PPO活性具有较好抑制作用，柠檬酸、半胱氨酸也对莲藕PPO活性具有一定抑制作用。可以通过浸泡亚硫酸钠和抗坏血酸(Vc)、调节pH值、低温贮藏等方法来抑制莲藕PPO活性，控制莲藕褐变。关键词：多酚氧化酶；活性测定；抑制剂IIActivityDeterminingandInhibi

2、tingPolyphenolOxidaseAbstract：[Objective]TheresearchamiedtostudytheenzymaticcharacteristicsofPPOinlotussprou.t[Method]Theeffectsoftemperature,pHvalueandinhibitorsonPPOactivityoflotussproutwerestudiedusingspectrophotometrymethod,catecholassubstrate,andthereactionkineticequationwasestablish

3、ed.[Result]TheresultsshowedthattheoptmiumtemperatureandpHwere30℃and6.0respectively.PPOwasinactivitywhenkeepingheatin70℃by60min.Ascorbicacid,citricacid,L-cysteineandstannouschloridecouldallinhibitPPOactivity,andthestrongestinhibitorsoftheactivitywereL-cysteine,stannouschloride,followedbyci

4、tricacid,ascorbicacid,0.20g/LL-cysteine,stannouschloridecouldinhibitPPOactivityeffectively.[Conclusion]Thestudycanprovidereferenceforreasonablyutilizingthelotussproutresourcesandthescientificcontrolofitsenzymaticbrowningduringdeepprocessing.Keywords：PPO；Inhibitor；Activitydetection II目录1绪论

5、11.1选题背景及意义11.2最新研究成果及动态11.2.1鲜切莲藕组织中多酚氧化酶的分离纯化11.2.2不同小麦多酚氧化酶活性检测方法的比较11.2.3PPO活性与小麦粉主要理化指标的关系21.2.4核桃组织培养中外植体褐变多酚氧化酶活性的控制21.2.5石榴果皮中的多酚氧化酶(PPO)活性测定的最佳试验条件21.2.6纯化的莲藕多酚氧化酶(PPO)与底物和抑制剂相互作用时的二级结构变化21.2.7磁场和抑制剂对莲藕多酚氧化酶反应动力学的影响21.2.8南湖菱果中多酚氧化酶抑制剂对其活性的影响31.2.9二氧化氯(ClO2)对鲜切莲藕在低温贮藏期间多酚氧化酶(PPO)的

6、影响31.2.10底物浓度、pH、温度对鲜切莲藕中PPO酶的影响31.2.11抑制剂对多酚氧化酶活性的影响31.2.12护色处理对多酚氧化酶活性的影响31.2.13气调包装对鲜切莲藕的保鲜效果42.1主要试剂及设备52.1.1实验材料52.1.2主要试剂与仪器52.2实验流程62.3分析方法62.3.1粗酶液的制备62.3.2PPO活性的测定72.3.3温度对多酚氧化酶活性的影响72.3.4pH对多酚氧化酶活性的影响72.3.5底物浓度对PPO活性的影响72.3.6抑制剂对多酚氧化酶活性的影响72.3.7用抑制剂对自制的粗酶液进行活性测定分析83结果与分析93.1温度对P

7、PO活性的影响93.2pH对PPO活性的影响103.3底物浓度对PPO活性的影响103.4抑制剂对PPO活性的影响123.4.1L-半胱氨酸对25KU多酚氧化酶活性的影响123.4.2单抑制剂对PPO活性的影响134结论15参考文献16致谢181绪论1.1选题背景及意义多酚氧化酶(Polyphenoloxidase，PPO)是植物体内普遍存在的一种非线粒体内的含铜末端氧化酶(Mayer1987；Mayer&Harel，1991)。它包括单酚氧化酶、双酚氧化酶和漆酶。它广泛存在于自然界，在果实和蔬菜收获后，PPO所引起的反应常常