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时间:2017-08-08
《纳米ZnO对斑马鱼生理代谢及相关基因表达的影响【优秀毕业设计】》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、本科毕业设计(20__届)纳米ZnO对斑马鱼生理代谢及相关基因表达的影响目录引言141材料与方法141.1材料141.1.1实验材料与试剂141.1.2主要仪器151.1.3实验动物151.2实验动物的处理151.3实验方法151.3.1酶液的提取151.3.2生理指标的测定原理151.3.3相关基因的测定方法161.4数据处理42实验结果42.1纳米ZnO对斑马鱼肝脏中生理代谢的影响42.1.1纳米ZnO对斑马鱼肝脏中TP的影响42.1.2纳米ZnO对斑马鱼肝脏中ALP的影响52.1.3纳米ZnO对斑马鱼肝脏中Tbil的影响52.2
2、纳米ZnO对斑马鱼肝脏中相关基因表达的影响62.2.1纳米ZnO对斑马鱼不同时间处理后肝脏中总RNA的影响62.2.2纳米ZnO对斑马鱼肝脏中MDR1基因表达的影响72.2.3纳米ZnO对斑马鱼肝脏中NKA基因表达的影响73讨论83.1纳米ZnO对斑马鱼肝脏中相关生理代谢影响的机制83.1.1纳米ZnO对斑马鱼肝脏中TP影响的机制83.1.2纳米ZnO对斑马鱼肝脏中ALP影响的机制83.1.3纳米ZnO对斑马鱼肝脏中Tbil影响的机制93.2纳米ZnO对斑马鱼肝脏中相关基因表达影响的机制93.2.1纳米ZnO对斑马鱼肝脏中MDR1基因
3、表达影响的机制93.2.2纳米ZnO对斑马鱼肝脏中NKA基因表达影响的机制93.3纳米材料对斑马鱼毒性相关机制的探讨94展望10致谢12参考文献14摘要:纳米材料具有特殊的物理和化学性质,使其在各个领域的应用日益广泛。人类及动物与纳米材料的接触已经不可避免,纳米材料的生物安全越来越被人们关注。本文应用浸浴法研究了纳米ZnO对斑马鱼(Daniorerio)肝、肌肉、肠、鳃中几种生理指标以及利用RT-PCR技术检测了纳米ZnO对肝脏中MDR1(Multipledrugresistancegene)、NKA(Na+-K+-ATPase)基因
4、表达的影响,结果显示:与对照组相比,0.1mg·L-1的纳米ZnO处理6h时,斑马鱼肝脏TP(Proteintotal)显著增加(p<0.05),处理24h、48h时TP显著下降(p<0.05);处理6h和72h时肝脏ALP(Calkalinephosphatase)显著性增加(p<0.05);处理72h肝脏中Tbil(Bilirubintotal)显著性下降(p<0.05);用BioSensGelImagingSystem软件对所得电泳图进行分析,以各基因的绝对含量与相应actin的绝对含量作比,不同时间处理的斑马鱼肝脏中MDR1、
5、NKA与对照组相比存在显著性差异(p<0.05)。关键词:纳米材料;斑马鱼;生理指标;MDR1;NKAAbstract:OwingtoNanomaterials’uniquephysicalandchemicalproperties,theyhavebeenusedextensivelyinvariousfields.Humanandanimalsexposuretonanomaterialsareinevitable.Thebio-safetyofnanomaterialsisstartingtogainmoreandmoreatt
6、ention.TheeffectsofnanoZnOonseveralphysiologicalindicesinliver,muscle,gut,andgilltissuesofZebrafishwerestudiedwithaddictiveindexmethod.Atthemolecularleveloftoxicity,ralativeexpressionofmRNAforMDR1(Multipledrugresistancegene)andNKA(Na+-K+-ATPase)inZebrafishweredetermined
7、byRT-PCRaftertreatwith0.1mg·L-1nanoZnOforupto72h.Comparedtothecontrol,theliverproteintotal(TP)ofZebrafishexposedto0.1mg·L-1nanoZnOfor6hwereincreasedsignificantly(p<0.05).Nevertheless,at24h,48hweredecreasedsignificantly(p<0.05).TheliverCalkalinephosphatase(ALP)ofZebrafis
8、hexposedfor6h,72hwereincreasedsignificantly(p<0.05).Nevertheless,thecontentoflivers’Bilirubintotal(Tbil)for72h
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