纳米Al2O3对斑马鱼肝基因表达的影响【毕业设计】

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1、本科毕业设计（20__届）纳米Al2O3对斑马鱼肝基因表达的影响目录1引言12实验材料与方法12.1实验材料12.1.1.实验用鱼12.1.2主要仪器和设备22.1.3主要试剂22.2培养方法22.3实验方法22.3.1染毒22.3.2组织提取22.3.3RNA的提取22.3.4基因检测32.3.5数据处理33.结果33.1肝组织在纳米Al2O3处理不同时间下总RNA的提取43.2常规RT-PCR检测相关基因的表达水平43.2.1纳米Al2O3对斑马鱼肝脏中hsp70基因表达的影响53.2.2纳米Al2O3对斑马鱼

2、肝脏中mdr基因表达的影响53.2.3纳米Al2O3对斑马鱼肝脏中nka基因表达的影响63.2.4纳米Al2O3对斑马鱼肝脏中mtf1基因表达的影响74.讨论84.1纳米Al2O3影响斑马鱼肝脏中hsp70基因表达的机理分析94.2纳米Al2O3影响斑马鱼肝脏中mdr基因表达的机理分析94.3纳米Al2O3影响斑马鱼肝脏中nka基因表达的机理分析94.4纳米Al2O3影响斑马鱼肝脏中mtf1基因表达的机理分析95总结和展望10致谢10参考文献:11附录12摘要：纳米材料的生物安全性问题之所以受到科学家们的关注，是因

3、为纳米材料特殊的物理化学性质可能会导致它们在生物体内的生理行为与常规物质不同，在环境中的行为也可能与常规物质不一样。本文应用浸浴法研究纳米Al2O3对斑马鱼肝基因热休克蛋白70(hsp70)、多药耐药基因(mdr)、Na+-K+-ATPase(nka)、金属调节转录因子1(mtf1)表达的影响。结果表明，经5.6mg·L-1的纳米Al2O3处理不同时间后，发现经过6h的稳定期后各基因表达量均上调，一般在12h小时达到最大值，用BioSensGelImagingSystem软件对所得电泳图进行分析，求出各基因的相对含

4、量，得出斑马鱼肝脏中hsp70、mdr、nka、mtf1与对照组相比存在显著性差异（P<0.05）。关键词:纳米材料斑马鱼；hsp70；mdr；nka；mtf1Abstract:Owingtonano-materials'specialnatureofphysicalchemistry,thesecurityproblemsofnanomaterialsisconcernedbyscientists.Thephysiologicalbehaviorofnanomaterialsinvivoisdifferentfr

5、omconventionalmaterials,thebehaviorintheenvironmentmaybenotthesameasconventionalmaterials.TheeffectofnanoAl2O3onheatshockprotein70(hsp70),multidrugresistance(mdr),Na+-K+-ATPase(nka)andmetal-responsivetranscriptionfactor-1(mtf1)ofzebrafish'sliverwasstudiedwitha

6、ddictivemethod.Theresultsshowedthatallgeneswererapidlyexpressedafter6hourwhichwascalledtheincubationperiod,andachievedmaximumvalueat12hour.TheBioSensGelImagingSystemsoftwarewasusedtodealwiththeagarosegelelectrophoresisimagestogetthecorrespondingratios(gene/act

7、in).TheralativeexpressionofmRNAforhsp,mdr,nkaandmtf1inZebrafish’sliverweresignificantlyhigherthanthoseinthecontrolgroup(P<0.05).Keyword:Nano-materials;zebrafish;hsp70;mdr;nka;mtf11引言根据ASTM标准的定义,纳米材料的结构单元尺寸介于1nm-100nm之间，其特殊的理化性质取决于它的颗粒大小[1,2]、表面积和表面分布、化学构成纯度、结晶

8、型、带点性、表面结构、溶解性、形状和聚集性等[3]。自20世纪70年代问世以来,已被广泛应用于各领域，包括涂料、废水处理、杀菌、化妆品、食品添加剂、生物医药等，是一类具有重要理论价值和广阔应用前景的新型功能材料[4,5]。Grazyna等[6]等报道，2004年纳米材料的年产量约为1000吨，每天有超过800件的产品生产基于纳米材料，预计到2014年全球将超