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1、小麦成熟胚离体培养探究摘要：以美国小麦品种Overley成熟胚作为外植体进行离体培养，研究外源激素对小麦成熟胚诱导愈伤组织、分化出苗以及试管苗增殖的影响。试验结果表明，在MS培养基中添加2,4-D3mg・L-1愈伤组织诱导频率较高，成愈率为84.0%；在添加有KT2~3mg•L-1的MS分化培养基中愈伤组织分化率较高，可达85%以上；将试管苗转接至添加0.2mg•L-1的NAA和0.5〜2.0mg•L-1的6-BA的培养基中,试管苗有一定的分化增殖，但最高分化率仅为33.3%,增殖系数2.05o关键词：小麦；成熟胚；离体培养；植株再生StudyonMatureWhea
2、tEmbryosCultureinVitroSUNNingl,ZHAOXin-hai2,CHENXiao-qiangl,ZHANGLEil(1.DepartmentofAgronomy,TianjinAgriculturalUniversity,Tianjin300384,China；2.DepartmentofComputerScienceandInformationEngineering,TianjinAgriculturalUniversity,Tianjin300384,China)Abstract：MaturewheatembryosofOverleywer
3、eusedasexplantsforcultureinvitro.TheresuItshowedthattheoptimummediumforcallusinductionwasMS+2,4~D(3.0mg•L-l),thera.teofcallusformationwas84.0%.ThemediumforcallusdifferentiationwasMS+KT(2〜3mg•L-l),thedifferentiationofcalluswasmorethan85%.Thewheatplantletshadlowdifferentiationrateandmulti
4、plicationcoefficientinMS+NAA(0.2mg•L-l)+6~BA(0.5~2.0mg•LT),whichwere33.3%and2.05.论文代写Keywords：wheat；matureembryo；invitroculture；plantregeneration目前，随着生物技术的发展，利用生物技术方法改良小麦品种资源越来越受到重视。幼胚被许多研究者认为是用于小麦离体培养最有效的转化受体，被广泛用于体细胞无性系变异与基因遗传转化的研究，但幼胚的培养会受到季节、时间等限制，且难以重复试验［1-2］；而小麦成熟胚具有良好的再生能力，具有种子保存
5、期长、易获得、取材方便、操作简单、试验周期短、成愈率高、愈伤组织成长快、一次成苗率高等优点，有助于解决以上的问题。有关小麦成熟胚培养研究的报道中，愈伤组织的诱导及分化频率的问题仍在探讨，进一步改善成熟胚供体小麦种子的生理状态，优化多种培养条件，提高胚性愈伤组织的形成能力，仍然是目前小麦成熟胚培养面临的主要问题。因此，研究成熟胚组织培养的影响因素，并优化培养条件是提高小麦成熟胚离体培养效率的关键。1材料和方法1.1材料供试材为当年产美国堪萨斯州立大学引进的冬小麦品种Overley,选取籽粒饱满、大小均匀一致的种子，取其胚作为培养材料。1.2方法1.2.1愈伤组织诱导将小
6、麦种子用清水冲洗净，浸种24h后备接种用。预处理后的小麦种子用75%的酒精浸泡30s,然后用0.1%的升汞浸泡10min,无菌水冲洗3〜5遍。剥取小麦种子的成熟胚，接种于添加不同浓度2,4-D(1,3,5,7mg・L-1)的MS固体培养基(蔗糖20g・L-1)中进行愈伤组织的诱导。每处理接种50枚，重复3次。毕业论文1.2.2分化培养取愈伤组织接种到分化培养基中，共设计7种激素处理，分别为：MS+6-BA0.5mg・L-1,MS+6-BA1mg・L-1,MS+6-BA2mg・L-1,MS+6-BA3mg・L-1,MS+KT1mg-L-1,MS+KT2mg・LT,MS+
7、KT3mg・LT,每种培养基中添加蔗糖15g・L-lo1.2.3试管苗的增殖培养诱导出苗培养30d后，当试管苗生长到3〜5cm左右进行增殖培养,增殖培养基为MS+NAA0.2mg・L—1+6—BA(0.5,1.0,1.5,2.0mg・LT)+蔗糖15g・L—1+琼脂6.4g・L-l,pH5.8O1.2.4培养条件每日光照12h,光照强度约为2000lx,室温(25±；2)°C。2结果与分析2.1不同浓度2,4-D对小麦成熟胚愈伤组织诱导的影响将小麦成熟种子的胚剥离，接种到添加有4种浓度2,4-D的MS培养基中，培养4〜5d后开始形成愈伤组
