血红蛋白电泳实验报告

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1、实验汇报实验名称：血红蛋白电泳项目名称：两种碱性血红蛋白样品处理方法的电泳结果实验时间：2018年9月17日实验室：龙泉驿区妇幼保健院检验科实验人员：杨松报告单位：成都温伦科技有限公司一、实验目的：1、掌握生理盐水处理血红蛋白样品的方法2、掌握四氯化碳处理血红蛋白样品的方法3、掌握电泳仪实验的操作4、分析两种碱性血红蛋白样品处理方法电泳结果的不同二、实验原理：血红蛋白电泳就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小,形状等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而对样品进行分离,鉴定或提纯的技术，在临床检验中,主要用于分离各类蛋白分子。三、实验

2、方法：琼脂糖电泳法四、实验器械：样品：10个EDTA抗凝管抽取的病人全血样品试剂：0.9%生理盐水500ml，四氯化碳500ml，界面液250ml，美国HelenaSpife3000血红蛋白电泳检测试剂盒器材：移液枪，一次性移液枪头若干，EDTA抗凝管10个，玻璃试管10个设备：美国HelenaSpife3000全自动电泳仪五、实验步骤：1、取得医院检验科EDTA抗凝管抽取的病人全血样品10个，编号为1，2,3......10。2、将1-10号十个个样品分别用移液枪取200ul到玻璃试管中，编号为1-1,2-1,3-1,.....10-1。3、将1-10号10个样品进行生理盐

3、水前处理，处理方法如下：-用0.9%生理盐水混匀，3500rpm离心10分钟.-吸走弃去清液。-以上步骤连续进行三次。-完全吸走弃去上清液。-20ul制作后的样本+80ul溶血素，混匀。-取溶血后的样本17ul加入样品孔。4、将1-1到10-1号10个样品进行四氯化碳前处理，处理方法如下：-用0.9%生理盐水溶液5000μL与样品混合。-3000rpm离心5分钟。-弃去上清液，只留下红细胞。-加入200ul蒸馏水溶解红细胞。-加入300ul的四氯化碳，混合均匀，3000rpm离心5分钟。-取上面萃取后的血红蛋白液17ul加入样品孔。5、记录下这20个样品的样品孔编号，将样品孔

4、放入样品板，摆放进电泳槽中，放上加样刀锋，添加界面液，放上琼脂板，掀开琼脂板保护膜，吸取多余界面液，放上碳棒，关上电泳槽的盖子，启动设备开始电泳。1、大约30分钟后，电泳完成，取出碳棒放好，铲掉琼脂板上的盐桥，取出琼脂板，放入染色槽中进行染色脱色干燥。2、大约30分钟后，染色脱色干燥完成，取出琼脂板，放入扫描仪中进行扫描，用PT软件进行分析数据，记录数据。六、实验数据：前处理方法一（生理盐水）前处理方法二（四氯化碳）样品编号HbAHbA2HbAHbA2197.47%2.53%97.28%2.72%297.03%2.97%96.82%3.18%396.71%3.29%95.96

5、%4.04%497.19%2.81%95.84%4.16%596.07%3.93%95.56%4.44%696.97%3.03%95.98%4.02%797.23%2.77%96.86%3.14%896.88%3.12%96.52%3.48%997.21%2.79%96.86%3.14%1097.45%2.55%96.95%3.05%七、实验结果：采用前处理方法二（四氯化碳）处理的血红蛋白，相对于前处理方法一（生理盐水）处理的血红蛋白，电泳结果HbA2偏高，HbA1偏低，电泳条带更加聚集。八、参考文献：电泳技术以及其临床应用ISBN7-5381-4777-2实验室质量管理CN

6、AS-CL27琼脂糖电泳的发展和研究ISBN：978703058338