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1、·26·(总第134期)水利渔业2004年第24卷第4期无机离子对淀粉酶活性的影响1,2111聂国兴,明红,胡建业,丁辉12(河南师范大学生命科学学院,新乡453002;上海水产大学渔业学院)++2++摘要:Na、K、Mg浓度在一定范围内,对淀粉酶活性有激活作用,其中以K激活作用最显著,当+2+2+2+2+2+K浓度为1.00mg/mL,酶活达到213.98%;Mn、Zn、Co、Fe、Cu浓度在一定范围内对淀粉酶活性2+2+-2+有抑制作用,其中以Cu、Mn抑制作用最显著;I、Ca在不同浓度条件下有不同
2、的作用。关键词:无机离子;淀粉酶;激活;抑制中图分类号:S912,S963173文献标识码:A文章编号:1003-1278(2004)04-0026-04淀粉酶作为饲料添加剂,合理应用可以提高畜禽及1.3.2碘贮液(1moL/L)称取1.7835g碘酸钾和水产动物的生产性能,增加养殖效益,减少排泄物对环境22.5g碘化钾溶于去离子水中,再缓慢加入4.5mL浓盐的污染,同时也可以开辟新的饲料资源,降低饲料成本。酸,用去离子水稀释至500mL充分混匀,贮于棕色瓶中,淀粉酶的催化效率极高,将1t淀粉转化为糊精
3、和麦芽糖置于冰箱中保存。仅需1000g淀粉酶。淀粉酶可以将淀粉水解成寡糖、糊1.3.3碘稀释液(0.1moL/L)取碘贮液用去离子水稀精及少量葡萄糖,从而提高饲料的利用价值。在水产饲释10倍,贮存在棕色瓶中,现配现用。料中添加淀粉酶,主要是为了补充水产动物肠道中内源2实验方法淀粉酶的不足,提高饲料转化效率。但是饲料原料中有许多因素影响淀粉酶的稳定性和2.1粗酶制剂浸提催化活性,其中之一即为无机离子。在本实验中,我们通称取0.5g酶粉,置于一小烧杯中加30mL去离子过探讨无机离子对淀粉酶活性的影响,建立了
4、无机离子水,在40℃水中搅拌30min,溶出酶蛋白,过滤定容至50浓度与淀粉酶活性的关系,以期为饲料工业生产和利用mL。按照表1添加不同浓度的无机离子,然后在40℃水淀粉酶奠定理论基础,使淀粉酶在饲料工业中能够得到浴中保温30min。[1～3]高效利用。表1无机离子添加方案mg/mL无机离子1234561实验材料+00.250.500.751.001.25Na+00.400.600.801.001.201.1仪器设备K2+00.100.200.300.400.50电子分析天平,恒温水浴锅,分光光度计。F
5、e2+00.060.120.180.240.30Mn1.2样品2+00.400.600.801.001.20Cu供试酶样由商丘福源集团韦斯迪生物技术公司提Zn2+00.400.600.801.001.20供。Mg2+00.400.600.801.001.202+00.060.120.180.240.301.3试剂Co2+00.751.502.253.003.751.3.1底物缓冲液精确称取9.0gNaCl、22.6lg无水Ca-00.080.160.240.320.40I磷酸二氢钠和12.5g无水磷酸二
6、氢钾置于500mL去离[4～6]2.2酶活性测定子水中,加热至沸腾溶解,称取0.4g可溶性淀粉于一小按表2分别加入底物缓冲液、酶稀释液、碘稀释液和烧杯中,加入10mL去离子水,使其混匀后加入上述沸腾去离子水,混匀,于660nm波长处以去离子水调吸光度溶液中,冷却至室温后加入5mL、37%甲醛溶液,再用去为0,并读取各管吸光值。离子水稀释到1000mL,此即为pH7.0、浓度为0.4g/L表2淀粉酶活性测定方案的底物缓冲液。加入物滴定管/mL空白管/mL收稿日期:2003-11-07底物缓冲液(40℃预温
7、5min)1.01.0基金项目:河南省自然科学基金资助项目(NO酶稀释液(混匀40℃水浴7.5min)0.20311030200),河南师范大学青年骨干教师资助项目碘稀释液1.01.0(NO200310306)去离子水6.06.2作者简介:聂国兴,男,1971年4月生,河南长垣人,上海水产大学在读博士生,研究方向为水产动物营养与饲料科学、饲用2.3酶活性计算酶制剂与营养免疫。2004年第24卷第4期水利渔业(总第134期)·27·淀粉酶活性=[(AB-AU)/AB]×800。式中:AB表示Mn2+浓度的
8、增加,相对酶活基本稳定在同一水平上,抑制空白管吸光度;AU表示测试管吸光度。作用不变。淀粉酶活性定义:100mL酶滤液中(1g酶粉)的酶在2+3.4Zn对淀粉酶活性的影响40℃和底物淀粉作用30min,水解产生10mg淀粉为1个2+由图4可知,Zn对淀粉酶有抑制作用。在0.00～淀粉酶活性单位。2+2.00mg/mL范围内,Zn的抑制作用随着浓度的增加而2.4相对酶活计算增强。其中在0.00～0.80mg/mL范围内,抑制作用随着以不加离子
