根霉形态及其原生质体制备的研究简介【文献综述】

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1、毕业论文文献综述生物技术根霉形态及其原生质体制备的研究简介摘要：根霉是霉菌中一种具有多酶系特征的霉菌，它不仅能分泌淀粉酶外，还能分泌酒化酶及乳酸、酸性蛋白酶、琥珀酸等多种有机酸，可以在整个发酵过程中始终边糖化边发酵连锁进行。在食品酿造工业中所用的主要原料，多数含有较多的淀粉，根霉能产生丰富的淀粉酶，使淀粉变为糖分，具有很好的糖化性能，是酿酒工业上常用的糖化菌。本文探讨介绍了根霉形态特性及其原生质体的相关研究。关键词：根霉；原生质体的制备；根霉形态；根霉特性根霉属(Rhizopus)包括接合菌亚门、接合菌纲、毛霉目、

2、毛霉科真菌中的一个大属。菌丝无隔、多核、分枝状，有匍匐菌丝和假根，借此可在基物表面广泛蔓延，不产生定形菌落。在假根的上方长出一至数根孢囊梗，顶端长球形孢子囊。囊的基部有囊托，中间有球形或近球形囊轴。囊内产大量孢囊孢子，成熟后孢囊壁消解或破裂，释放球形或卵形等孢囊孢子。有时在匍匐菌丝上产生横隔，随即形成厚垣孢子。有性生殖时由不同性别的菌丝或匍匐菌丝上生出配子囊，配子囊双双异宗配合形成一接合孢子。广泛分布于酒曲、植物残体、腐败有机物、动物粪便和土壤中。有重要工业应用，如米根霉(R.oryzae)的淀粉酶可用于制曲、酿酒

3、，华根霉(R.chinensis)、少根根霉(R.arrhizus)等可产乳酸，匐枝根霉(R.stolonifer,旧称黑根霉)等还能转化甾族化合物。也应用于甾体激素、延胡索酸和酶制剂的生产。有些根霉会引起甘薯、瓜果或蔬菜霉烂。黑根霉也称匐枝根霉，分布广泛，常出现于生霉的食品上，瓜果蔬菜等在运输和贮藏中的腐烂及甘薯的软腐都与其有关。黑根霉是目前发酵工业上常使用的微生物菌种。黑根霉的最适生长温度约为28℃，超过32℃不再生长。根霉在自然界分布很广，用途广泛，其淀粉酶活性很强，是酿造工业中常用的糖化菌。我国是最早利用根

4、霉糖化淀粉（即阿明诺法）生产酒精的国家。根霉能生产延胡索酸、乳酸等有机酸，还能产生芳香性的酯类物质。根霉亦是转化甾族化合物的重要菌类。与生物技术关系密切的根霉主要有黑根霉、华根霉和米根霉。根霉的菌丝无隔膜、有分枝和假根，营养菌丝体上产生匍匐枝，匍匐枝的节间形成特有的假根，从假根处向上丛生直立、不分枝的孢囊梗，顶端膨大形成圆形的孢子囊，囊内产生孢囊孢子。孢子囊内囊轴明显，球形或近球形，囊轴基部与梗相连处有囊托。根霉的孢子可以在固体培养基内保存，能长期保持生活力。黑根霉也称匐枝根霉，分布广泛，常出现于生霉的食品上，瓜果

5、蔬菜等在运输和贮藏中的腐烂及甘薯的软腐都与其有关。黑根霉(ATCC6227b)是目前发酵工业上常使用的微生物菌种。黑根霉的最适生长温度约为28℃，超过32℃不再生长。图中1为孢子囊、2为孢囊孢子、3为匍匐枝、4为假根。此外无性生殖时还可以产生接合孢子囊、芽孢子囊。原生质体是指除去细胞壁的细胞或是说一个被质膜所包围的裸露细胞。它是细胞生命的主体，是细胞最主要、也是最重要的部分，细胞的一切代谢活动都在此进行。原生质体融合技术起源于20世纪60年代。1974年，匈牙利的Ferenczy[1]采用离心力诱导的方法报道了白地

6、霉营养缺陷型突变株的原生质体融合，从而使原生质体融合技术成为微生物育种的一项新技术，并从微生物种内融合扩展到界间的融合（如光合细菌与酵母菌的融合）。原生质体融合就是用水解酶除去遗传物质转移的最大障碍——细胞壁，释放出只有原生质膜包被着的球状原生质体，然后用物理或化学方法诱导遗传特性不同的两亲本原生质体融合，经染色体交换、重组而达到杂交的目的，经筛选获得集双亲优良性状于一体的稳定融合子。原生质体融合与常规杂交相比有多方面的优势，除了能显著提高重组频率外，还具有定向育种的含义[2,3]。原生质体融合育种主要步骤如下：（

7、1）原生质体制备；（2）原生质体融合；（3）原生质体或融合子再生；（4）融合子的筛选。微生物原生质体融合起源起源于20世纪50年代，由Sa1Ton引入到微生物学中，1953年Weibull等首次用溶菌酶处理巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)得到原生质体，并首先提出原生质体在微生物学中的概念，此后经历了一个逐步改进和完善的过程。主要的原生质体的融合方法有：NaNO3、高钙高pH值、PEG法等，PEG法是采用聚乙二醇为融合剂的一种化学方法，使用简便、经济、可重复性强[4,5]。1常用的根霉原生质体制备

8、1.1材料的一般培养方式根霉、假丝酵母；化学试剂均为分析纯，生物试剂为生物纯；溶菌酶、蜗牛酶（北京奥博星生物技术有限公司）。1.2主要使用到的一起设备数显振荡培养箱BS-2F、显微摄像机Wat-202D、电脑、超净工作台SW-CJ-IB、相差显微镜OLYMPUS-CH型、低温冰箱三洋332。1.3主要使用到的试剂与设备P缓冲液：蔗糖103g，K2SO40.2