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时间:2019-11-22
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1、焦志军江苏大学附属医院检验科主任兼中心实验室主任博士、副教授、硕士生导师现代免疫学基础及进展--免疫球蛋白两个概念:免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig):1968年和1972年世界卫生组织和国际免疫学会联合会的专门委员会先后决定,将具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白。抗体(antibody,Ab)是指能和相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。抗体和免疫球蛋白的关系:抗体是免疫球蛋白,并非所有的免疫球蛋白都具有抗体活性。抗体是存在于血液中一群蛋白质的总称,在防御感染
2、及各种疾病发病时担任重要角色。抗体最特殊的功能是能与生物体的不同物质(抗原)反应而结合,具有非常独特的结合能力。血液中大概存在有五万多种不同的抗体,各种抗体只对特定的抗原产生反应。抗体是具有复杂的构造的巨大分子。免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig):具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白。血清含有各种蛋白质,其等电点均在pH7.5以下,若置于pH8以上的缓冲液电泳时均游离成负离子,再向正极移动。由于其等电点,分子量和分子形状各不相同,其电泳速度就不同。血清含有各种蛋白质,
3、蛋白质是一种生物大分子。当蛋白质带正电荷的时候,在电场中由阳极向阴极泳动;带负电荷时,在电场中则由阴极向阳极泳动。蛋白质的泳动速度与分子量、游离状态和所带电荷多少有关。免疫球蛋白的分类:(1)分泌型(secretedIg,SIg):主要存在于血液及组织液中,发挥各种免疫功能(2)膜型(membraneIg,mIg):构成B细胞表面的抗原受体人的Ig有五类,分别以IgG,IgA,IgM,IgD,IgE表示。第一节免疫球蛋白的结构和功能一、免疫球蛋白基本结构二、免疫球蛋白的其他成分三、免疫球蛋白的水解片段
4、四、免疫球蛋白的功能一、免疫球蛋白基本结构四肽链对称结构(一)重链和轻链重链(heavychain)简称H链由440个氨基酸组成,分子量约55-75KD。H链含有少量糖类,所以Ig属于糖蛋白。根据H链的抗原性不同,可将免疫球蛋白(Ig)分为五类。IgG的H链:γ链(gamma)IgA的H链:α链(alpha)IgM的H链:μ链(mu)IgD的H链:δ链(delta)IgE的H链:ε链(epsilon)轻链(lightchain)简称L链由220个氨基酸组成,分子量约25KD根据L链的抗原性不同,把L链
5、分成二型:κ型,λ型同一个Ig分子上H链同类,L链同型,把Ig分子分成五类十型(二)、可变区和恒定区免疫球蛋白轻链和重链中氨基酸序列变化较大的区域称为可变区(variableregion,V)免疫球蛋白轻链和重链中氨基酸序列较保守的区域称为恒定区(constantregion,C)重链和轻链V区(分别称为VH和VL)各有3个区域的氨基酸组成和排列顺序高度可变,称为高变区(hypervariableregion,HVR)或互补决定区(complementaritydeterminingregion,CD
6、R),分别为CDR1、CDR2和CDR3。CDR以外区域的氨基酸组成和排列顺序相对不易变化,称为骨架区(frameworkregion,FR)。表位绞链区位于CH1与CH2之间,含有丰富的脯氨酸,因此易伸展弯曲,而且易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解。绞链区能改变两个Y形臂之间的距离,有利于两臂同时结合两个不同的抗原表位。IgD、IgG、IgA有绞链区,IgM和IgE则无。(三)绞链区免疫球蛋白功能区的作用有:1.VH和VL是结合抗原的部位;2.CH1和CL遗传标志所在;3.IgG的CH2和IgM的CH3
7、具有补体C1q结合位点,可启动补体活化经典途径;4.IgGCH2可通过胎盘;5.IgG的CH2/CH3和IgE的CH4有亲细胞活性。二、免疫球蛋白的其他成分(一)J链J链是一富含半胱氨酸的多肽链,由浆细胞合成,主要功能是将单体Ig分子连接为多聚体。IgA二聚体和IgM五聚体均含J链;IgG、IgD和IgE常为单体,无J链。(二)分泌片(SP)由黏膜上皮细胞合成和分泌,以非共价形式结合到二聚体上,并一起被分泌到黏膜表面。1.使IgA分泌到黏膜表面,发挥黏膜免疫作用;2.保护SIgA绞链区,使其免遭蛋白水
8、解酶降解。三、免疫球蛋白的水解片段三、免疫球蛋白的水解片段★木瓜蛋白酶水解IgG得到两个相同的Fab段和一个Fc段。Fab:抗原结合片段特异性结合抗原表位Fc:可结晶片段激活补体通过胎盘结合细胞胃蛋白酶裂解IgG得到一个具有双价活性的F(ab’)2段和若干个小分子多肽碎片(pFc’)。F(ab’)2:特异性结合抗原表位pFc’:无生物学作用意义:1、阐明Ig分子结构和生物学特征2、指导制备免疫血清制品免疫球蛋白的异质性一、免疫球蛋白的类别:类:根据Ig重
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