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1、超声波-回流法银杏叶中总黄酮提取的研究摘要：对超声波和回流法两种不同提取银杏叶中总黄酮方法进行了探讨,研究超声浸提时间、乙醇浓度、料液比对银杏叶总黄酮浸捉的影响，并对试验结果进行验证.测定了银杏叶中总黄酮的含量。实验结果农明，超声波提取方法较回流法提取率高。超声波提取总黄酮的最佳操作条件是用80%乙醇浸提，时间50min,料液比1：10。关键词:银杏叶;黄酮;超声波；回流前言：银杏叶是银杏的叶片，含冇黄酮类活性物质。根据文献记载，银杏叶提取物在医药、保健品、化妆品等领域已得到广泛的应用。其所含有的黄酮类物质,可防止高血压及动脉硬化，活血化瘀，抗肝脏毒，抗炎，祛痰，解热，捉高机体免疫功能，抗
2、菌，抗病毒,缓解高血压患者的头痛等多种约理作用。它的提取主要以冋流法为主，操作简便，但费吋。木文釆用超声波提取方法并与传统的冋流提取方法比较；同时对超声波提取方法的各项影响因索进行了研究。结果表明,超声波提取法不但提取率高11节省时间。1实验部分1.1实验目的1.1.1探讨超声波和冋流法提取银杏叶中的总黃酮提取率的高低。1.1.2采用单因索实验探究超声浸提吋间、乙醇浓度、料液比对银杏叶总黄酮含量的影响。1.2实验原理银杏叶为银杏的干燥叶，我国的银杏资源占世界70%以上。银杏黄酮是银杏叶中主要活性成分之一，是开发医药、保健食品和绿色化学品的重要资源。另外银杏叶还含有39种营养及功能成分，包括
3、蛋片质、糖、维生索C、维生索E、胡罗卜索、18种氨基酸、25种矿物质营养微量元素，其中钙、磷、硼、硒含量较高，其他如人体所需的铁、氟、铜、猛、锌、珞等含量也较丰富，其屮维生素C、维生素E、胡罗卜素、硒、锌、钙等作为营养性抗氧化剂与非营养性抗氧化剂一银杏黄酮、惦内酯、儿茶素、多酚类等对保护机体不受自由基所致的氧化和损伤发挥着重要的作用。因此，将银杏叶作为高营养、保健功能价值的资源加以开发利用，这对于提高银杏叶综合利用率冇重耍意义。通常银杏中黄酮类化合物的提取方法有丙酮法、乙醇法、色谱法、酶法等，英屮酮醇捉取法是相当经典的方法，用醇、酮作捉取剂再结合超声波和微波法是近年来广泛采用的方法，由此本
4、文对两种方法的工艺条件和提取率进行了对比研究。国内外对银杏（叶、果、外种皮等）的有效成分研究表明，有黃酮类、二祜内酯、酚（酸）类、辎体化合物、生物碱、有机酸类等70余种化合物。丽两类为主要活性成分。黄酮类主要来源丁叶片，含量约为2.5-5.9%,已鉴定出的黄酮类化合物达44种，其屮双黄酮6利黄酮甘元7种，黄酮甘20利还有儿茶素，黄酮甘等。大量的黄酮甘为山奈酚、榊皮素和异鼠李素的单、双、参糖昔，如山奈酚-3-0-glu,榊皮素-3-0-glu,异鼠李索-3-0-glu,及三种昔元在3位与芸香糖形成的昔，它们是银杏黄酮类有效成分的主体物质。银杏叶屮双黄酮类包括银杏双黄酮、去叩银杏双黄酮、异银杏
5、双黄酮、金银松双黄酮等。双黄酮、银杏酚酸类能与其它化合物形成复合物或有致敏作用需除去。银杏（苦）内酯类是苦味成分，属二帖内酯，主要有银杏内酯A、E、C、J、M五种，为银杏的重要有效成分，至今尚未发现其存在于其它任何植物中，其中M仅存在于银杏皮中。另有一倍半耕内酯为口果内酯。银杏叶黄酮类物质用稀乙醇溶解捉取，传溶于稀乙醇屮，经碱性稀醇稀释后可与硝酸铝络合成黄色络合物。在亚硝酸钠存在下，该络合物含量（颜色深浅）与其在波长为500nm时吸光度成正比。与标准芦丁相比较，可求得银杏叶中黄酮含量。1.3材料与仪器1.3.1仪器：超声波清洗器，索氏提取器，蒸丫留装置，烧杯，容量瓶，移液管，具塞刻度试管，
6、水浴锅，电子天平，分光光度计1.3.2样品与试剂:银杏叶,滤纸，70%乙醇,30%乙醇,5%NaN02,10%Al（N03）3,可见分光光度计，4%NaOH,芦丁标准液1・4方法（银杏叶中黄酮的提取）将银杏叶烘干，粉碎备用。1.4.1超声波捉取法准确称取银杏叶lg置于锥形瓶中，分别加入80%乙醇lOmL,超声波提取50min过滤,蒸憾冋收乙醇，得浓缩液。1.4.2冋流热提取法准确称取银杏叶粉末lg置入圆底烧瓶屮，加入90%乙醇30mL,于80°C的水浴锅里加热回流3小时，趁热过滤,蒸憾回收乙醇，得浓缩液。1.4.3银杏叶中总黄酮含量的测定标准液的配制：准确称取芦丁标准品5mg,用乙醇溶解，
7、完全转入50容量瓶中，摇匀即得0.1mg/ml的标准溶液。分别准确吸取标准液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、ml分别置10ml具塞试管中,蒸憾水对照，各加30%乙醇至5ml。先加5%亚硝酸钠溶液0.3ml,摇匀，放置6min。再加10%硝酸铝溶液0.3ml,摇匀，再放置6mine加4%氢氧化溶液4ml。各用蒸纟留水稀释至10ml,放置15min,在波长510nm处测定各试管中溶液的吸光（蒸憎水作空O）o以
