棉花GLEC1A基因的克隆和鉴定

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1、第33卷第5期前加10月Vol.33No.5Oct.2015石河歆灣嗽报『劇科糕版JournalofShiheziUniversity:NaturalScienceD0l:10.13880/j.cnki.65-1174/n.2015.05.002妄静昜5)05-0535-06棉花G.LEC1A基因的克隆和鉴定樊可心-曹爱萍张文婷I郝小军2,崔百明(1石河子大学生命科学学院/农业生物技术重点实验室,石河子832003;2石河子大学农学院/生产建设兵团绿洲农业生态重点实验室,石河7-832003)篇甌為『碼宪禰梅网谢藕

2、励做功綸制鹽龄加剧曙廃咖戦濃愉超m幽闵询基酗QLEClA),构建pCAMG.LEClA植物表达载体,用农杆菌龍花法转化拟南LEC1缺失突变体lecl-1.通过干燥筛选方法检验LEC1功能恢复悄况。结果表明:G.LEC1A基因的ORF全长为627bp,编码208个氨基酸,具有LEC1蛋白家族保守的B结构域。组成型表达G.LEC1A可恢复拟南芥leel-l突变体种子的干燥耐受性c研究结果说明,棉花LECIA基因是拟南芥LEC1的同功基因。申伺缺牙熾6靳188+】文献标志码:ACloninganddateniificati

3、onof的JEQdAGenefromCotton(Gossypiumbarbadense)FANKexin^CAO矗泗奴gf/HANGWenting*,HAO画岫咋仙IBaiming1(1CollegeofAifie血如oe^ShiheziUniversity/KeyJ(^>ratory"lAofeM坯fetology.Shihezi832003,China;2CollegeofAgriculture,ShiheziMftj疔嚥fiffroductionandiuddwlruchonCorpsOasistAgyiou

4、kuralEcologyKey咖琥珈眇00胡832003,China)uMl$toact:ToexplorethefunctionsofLEC1geneincotton,aJ

5、jy^>logousgeneofLECIwasclonedfrom血wasnamedasG.LEC1A.Theplantexpressionvectors翅^J&・LEC1Awere嗽痂thenitwastransformedintoArabidopsisLECIdefectmutantlecl-1J)yAgrobacteriumflorald

6、ipmethodforgenecomplemenlationtest.TheresultsshowedthatG.LEC1Agenecontainsa627J)plengthsofopenreadingframe(ORF)whichencodesapolypeptideof208aminoociliuiresiduesMithaconservedBdomainofjJyElQ-typeproteins.TheG.LEC1AgenewasexpressedintransgenicArabidopsis朋ntsandth

7、etransgenicowMioredtheseedsdesiccationtoleranceofkX割亦TheseresultssuggestilhH^llG.LEClAisa(hivuutionalhomologofArabidopsisLECI.Keywords:Gossyp/urnbarbaden^l^C1;vectorconstniction;genetic何顽&?血册巾讷mctiormlanalysisLECI是拟南芥胚胎发生的重要调节因子,控制着胚胎发育的许多不同方面叭LEC1是CCAAT-box结合因

8、子(CBFs)亚基HAP3的同源物叫HAP3有3个结构域:分别为N端和C端的不保守的A域和C域及中部的保守的B域叫其中B域是HAP3与其他蛋白质亚基相互作用的位点,也是CBF复合体与DNA结合所必须的位点⑶。依据B域氨基酸序列相似性,拟南芥HAP3(AHAP3)家族的10个成员可分为2大粪昇畛璽禅触J蜒酬1曲釉SE训和LEC1-LIKE(L1L)属LEC1类型,主要在种子发育过程中表达,翱跚稔稱删需淇慕鋼囲咙據心类型⑶。Ku®型。塑褂腐砂希噺的氟咖舷一Asp55是其调控胚胎发生的必要条件,同时可使非LEC1型B结构域

9、具备部分LEC1型基因的活性。这表明B域魁脑瞒寵泌縱玻邨域叫LEC1基因在高等植物中普遍存在,且功能保守『%妁国期打0她~03-10藝金顶冃:农删精鯛囲沏觑新励时藏穆披鹘極)豌側IZXO8OO5-OO2)作者简介:樊可心(1988-),女,硕士研究生,研究方向为植物分子遗传学,e-mail:fanRexinlfm@126.com°通信作者:崔百

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