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《厚壳贻贝三个野生群体遗传多样性ISSR分析【开题报告】》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、毕业论文开题报告生物科学厚壳贻贝三个野生群体遗传多样性ISSR分析一、综述本课题国内外研究动态,说明选题的依据和意义厚壳贻贝(Mytiluscoruscus)属双壳纲,异柱目,贻贝科,俗称海红。广泛分布于我国的黄海,渤海和东海沿岸,浙江省自然资源较多。由于人工养殖的原因,目前对养殖的厚壳贻贝研究比较多,而野生的贻贝研究相对较少。关于野生厚壳贻贝的研究也主要集中生理生态、养殖育苗、胚胎发育、组织结构等方面,而有关遗传学方面的文章较少。ISSR(Inter-simpleSequenceRepeats),即简单重复序列区间
2、,是Zietkewiecz等于1994年创建的一种DNA分子标记技术,具有模板需要量少,操作简单、稳定、可重复性好及多态性丰富等优点。其基本原理是:用锚定的微卫星DNA为引物,即在SSR序列的3'端或5'端加上2-4个随机核昔酸,在PCR反应中,锚定引物可引起特定位点退火,导致与锚定引物互补的间隔不太大的重复序列间DNA片段进行PCR扩增。所扩增的interSSR区域的多个条带通过聚丙烯酞胺凝胶电泳得以分辨,扩增谱带多为显性表现。ISSR引物的开发不像SSR引物那样需测序获得SSR两侧的单拷贝序列,开发费用降低。与S
3、SR标记相比,ISSR引物可以在不同的物种间通用,不像SSR标记一样具有较强的种特异性;与RAPD和RFLP相比,ISSR揭示的多态性较高,可获得几倍于RAPD的信息量,精确度几乎可与RFLP相媲美,检测非常方便,因而是一种非常有发展前途的分子标记。目前,ISSR标记已广泛应用于植物品种鉴定、遗传作图、基因定位、遗传多样性、进化及分子生态学研究中。ISSR技术在水产动物中应用较少,目前仅在三角帆蚌、缢蛏、西施舌等贝类,以及少数鱼类中有所应用,ISSR技术在厚壳贻贝中的应用尚为空白。二、研究的基本内容,拟解决的主要问题
4、:1、研究的基本内容:采用ISSR技术对野生厚壳贻贝基因组DNA进行PCR扩增,从而分析三个野生厚壳贻贝种群的遗传多样性。2、拟解决的主要问题:厚壳贻贝(Mytiluscoruscus)为我国重要海产资源之一,由于其繁殖快、生长快、营养价值高等特性,而成为海水养殖业中引人关注的种类。由于过度捕捞等原因,现今种质资源严重退化,已濒临枯竭的危险,开展养殖、增殖放流等手段进行资源修复势在必行,利用分子标记手段研究野生厚壳贻贝的遗传多样性,对研究其资源退化原因及其资源保护、生产实践具有重要指导意义。三、研究步骤、方法及措施:
5、1.研究步骤及方法:(1)查阅文献资料;(2)实验方案设计;(3)对各种ISSR-PCR扩增的主要影响因子进行实验;(4)数据统计分析:通过实验获得的数据,用计算机进行数据分析;(5)撰写论文:根据实验数据与参考文献撰写毕业论文。2.措施:(1)采集野生厚壳贻贝的样本;(2)将样品带回实验室处理;(3)对样本提取DNA,跑PCR,电泳,拍照;(4)处理获得的数据;(5)根据实验结果撰写论文。四、参考文献[1]常亚青,陈晓霞,丁君,等.虾夷扇贝(Patinopectenyessoensis)5个群体的遗传多样性[J].
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