《呼吸道标本的实验室检查及结果解读》

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1、2015/7/1主要内容呼吸道疾病的分类哪些呼吸道疾病需要做病原学检查呼吸道感染病原学检查方法采集不同标本的临床意义标本处理程序北京医院快速筛查试验陈东科检验结果解读一、呼吸道疾病的分类正确诊断是抗感染合理用药的前提1.感染性炎症(由各种微生物引起);2.非感染性炎症:结节病、过敏性肺炎、嗜酸细胞浸●非感染性炎症不需要进行抗感染治疗润性肺炎、急性间质性肺炎、放射性肺炎、药物相关要慎重甄别炎症的性质的肺疾病、支气管哮喘、Wegener’s肉芽肿等;●不同病原体感染需要不同抗病原药物3.非炎症病:气胸、肺栓塞、充血性心衰、肿瘤引起病毒感染需要抗病毒治

2、疗阻塞肺炎、淋巴瘤、肺泡蛋白沉积征等。寄生虫感染需要抗寄生虫治疗真菌感染使用抗真菌药物治疗细菌感染才使用抗细菌药物治疗鉴别诊断很重要二、哪些疾病需要做病原学检查排除性诊断技术(影像学、病理学、免疫学、分子生不必常规做病原学检查的肺炎:物学、抗原检测、感染标志物等);无基础疾病的轻症社区获得性肺炎。采用特异性高的诊断技术,如肺栓塞采用同位素检查;需要做病原学检查的肺炎:必要时可进行诊断性治疗,如过敏性肺炎采用激素。需住院治疗的中重症肺炎、住ICU的中重症肺炎、医院获得性肺炎、免疫抑制宿主肺炎、疑似耐药菌感染的肺炎、特殊病原体引起的肺炎、常规抗菌治疗无效或吸收

3、延迟的肺炎等。12015/7/1三、呼吸道感染病原学检查方法四、采集不同标本的临床意义涂片镜检法咳痰培养法经支气管吸引物(TTA)PCR法经胸壁针刺吸引物(TNA)基因芯片技术经支气管镜采样标本(BAL,PSB)感染标志物检查(PCT、CRP、IL-6、1-3-β-D-葡开胸肺活检(OLB)组织标本聚糖、半乳甘露聚糖等)经人工气道采样的下呼吸道标本快速抗原检查(尿、胸水、脑脊液、分泌物等)微生物学检验的标准化首先应从标本采取与处理的规范化开始。标本采集时机的影响“正确的微生物学检验始自正确炎症的消退也许很漫长,但如果用药正的标本采取。临床

4、医师、护师确很多病原菌会很快消失。及检验技师都必须通晓其要领。”___引自著名的临床微生物检验专著《ManualofClinicalMicrobiology》主编PatrickMurray的话22015/7/1五、标本处理程序六、快速病原筛查试验(1)去污染处理:要提高从混合菌标本中分离可疑病原菌的分离率,有必要对标本进行去污染处理。例如:分离分枝杆PCR法菌前对标本进行酸(或碱)处理,对怀疑有芽孢杆菌感染的基因芯片法标本要进行热处理(或用乙醇预处理)。(2)浓缩:其目的是为了集菌,常用的方法有沉淀法(离心)涂片镜检法:操作最简单、费用最低、用时最短,结果和漂

5、浮法(饱和盐水和汽油法等)。最直观的检验方法就是标本直接涂片、染色或不染色、显(3)洗涤:减少口腔定植菌的污染。微镜检。(4)涂片:粘稠标本最好压片处理。(5)消化:其目的是为了将被粘液或组织包裹的病原体释放出来。(6)接种:根据患者病情、涂片镜检结果选择培养基及孵育条件。2011年世界卫生组织(WHO)对临床微生物实验室提出三项指导性方针:临床微生物实验室尽可能把目标集中在快速诊断方面显微镜检查对建立快速的初步诊断具有很大价值实验室人员必须主动与临床结合,将实验室数据转化为临床有用的信息标本直接涂片镜检的临床意义标本涂片制作方法制片很重要!►根据对标本直接

6、涂片、镜检,即可获得感染病原涂片的制备水平及染色的质量,直接影响到镜检的结的信息。即细菌、真菌、螺旋体、寄生虫,或其他果。病原感染。并在第一时间通知临床医生,为医生经验用药提供参考依据。基本要求:涂片的厚薄以镜下见到单层细胞为宜;染色结果以细胞核、浆清晰,胞内吞噬物清楚可见,革兰染色阴、阳性分明为佳。32015/7/1制片步骤1.标本处理;2.压片;3.固定;4.拉片;5.染色.42015/7/1阅片:根据人体对细菌/真菌感染在早期主要以非特异性免疫(细胞免疫为主)的特点,选择痰标本中脓细胞成团块状分布,集中而不稠密,且周围无鳞状上皮细胞或无细菌大量分布的区域为

7、阅片区,观察视野中脓细胞聚集处的脓细胞胞浆中有无吞噬的细菌、或发现被脓细胞包裹的细菌、或与脓细胞伴行的细菌,以及细菌的染色性及排列特征,菌体特征等。并作记录,以此作为确定病原菌的理论依据。七、检验结果解读2.阳性结果解读(1)感染菌的确认:阴性结果解读:根据标本直接涂片镜检结果及肺穿刺结果,结合排除假阴性结果。细胞免疫理论进行分析。阳性结果解读:根据方法学原理、患者流行病学史等进行分析,注意排除污染或定植。药敏结果解读:遵守药敏试验规则,注意天然耐药、特殊耐药机制、感染部位(组织分布)、儿童用药等。阳性结果解读阳性结果解读(2)排除定植菌:(3)排除

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