植物组织培养资料

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1、植物组织培养资料植物组织培养复习题1.狭义的植物组织培养和广义的植物组织培养。狭义的植物组织培养，对植物小块组织的培养。广义的植物组织培养，泛指将植物体的各种结构成分（如植物细胞、植物原生质体、植物组织以及植物器官）甚至幼小植株放在离体的、无菌的人工环境中让其生长发育的方法。由于培养的对象大多是脱离母体的外植体，培养的器皿一般是在试管内，所以植物组织培养也叫离体（体外）培养或试管培养。2.植物组织培养的理论依据其理论依据是植物细胞具有全能性。细胞全能性是指植物体任何一个细胞都携带着一套发育成完整植株

2、的全部遗传信息，在离体培养情况下，这些信息可以表达，产生出完整植株。全能性的表现：受精卵（正常的分化）离体组织或器官（人工的诱导）3.植物胚胎培养的主要几个内容。胚培养、胚珠培养、胚乳培养、试管受精4.植物器官培养有哪些类别？离体根培养、离体茎培养、离体叶培养5.植物组织培养实验室的设计及各分室的仪器作用。通用实验室、无菌操作室（接种室）、培养室、细胞学实验室至少需要有两个隔开的房间：一间用于玻璃器皿的清洗和贮存，以及培养基的制备(培养基室)，第二间用于放置培养物(培养室)。工业化生产则还需有相应的

3、发酵设备及用于栽培试管苗的专用花房或遮荫棚等。实验室的大小和设置可根据自己的工作性质和规模自行设计，其中最主要的是无菌操作室（接种室）和恒温培养室。一、通用实验室主要用于植物组织培养所需器具的洗涤、干燥和保存，培养基的配制、分装和灭菌，化学试剂的存放及配制，重蒸馏水的生产，待培养植物材料的预处理及培养物的常规生理生化分析等操作。为了配制各种培养基，室内必须有一个较大的平面工作台及供放置各种培养器具的橱柜。二、无菌操作室（接种室）接种室主要用于植物材料的消毒和接种，培养物的继代转移等等。它应是无尘、无

4、对流空气的非常洁净的实验室。要求进入室内的工作人员的衣物、鞋帽、头发、手和脸都要十分清洁，避免带入杂菌造成污染。如果能换上工作服、工作帽和拖鞋，更是理想。主要仪器与设备：无菌操作台，紫外灯，换气扇，空调。无菌操作室最好设有内外两间：外间是缓冲间，内间是无菌操作室。缓冲间可使工作人员进入无菌操作室前有一个过渡，以减少将室外杂菌带入无菌操作室。缓冲室中可放置工作服、工作帽、拖鞋等，亦可用紫外灯随时进行灭菌。三、培养室培养室是培养试管苗的场所，要满足外植体生长所需的温度、光照、湿度和气体等条件。室内主要应

5、有培养架和控制温度和光照的设备。小型则用培养箱。*常用设备和器材一、灭菌设备——高压蒸气灭菌锅它是组织培养中最基本的设备之一，用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒等。目前有大型卧式、中型立式、小型手提式和电脑控制型等多种，可依据自身的工作规模和财力来选用。小型手提式蒸气灭菌锅（内热式）、中型立式灭菌锅二、接种工具双筒实体显微镜——多用于剥制植物茎尖。镊子——尖头镊子适用于解剖和分离叶表皮时用；枪形镊子，由于其腰部弯曲，适合于用来转移外植体和培养物。剪刀——有大、小解剖剪和弯头剪，适合于剪取外植体材

6、料。解剖刀——有活动的和固定的两种。前者可以更换刀片，较适用于分离培养物；后者则适用于较大外植体的解剖用。酒精灯——用于金属接种工具的灭菌和在其火焰无菌圈内进行无菌操作。三、培养设备培养设备是指专为培养物创造适宜的光、温、水、气等条件的设备，包括：空调机——供升温及降温用。温度控制器——供恒温用。增湿机或去湿机——供改善培养室湿度用。摇床或旋转床——在进行液体培养时，培养材料浸入溶液中，会引起氧供应不足。为改进通气条件，常用旋转床或摇床。全温摇床照度计湿度计、温度计培养架——供放置培养瓶用，培养架的

7、框子用木制或三角铁制皆可，但应漆成白色或银灰色，每层隔板可用玻璃或木材制成，但以玻璃板的光照效果好。日光灯——供光照之用。光照培养箱——供光照培养用，多用于外植体分化培养和试管苗生长之用，有可调湿和不调湿的两种规格。光照培养箱四、化学实验及分析设备天平——其中药物天平和扭力天平用于大量元素、琼脂和蔗糖等的称量。酸度计——培养基中的pH值十分重要，因此在配制培养基时需要用酸度计来测定和调整培养基的pH值。蒸馏水器——在植物组织培养中常要求使用蒸馏水或去离子水。烘箱或玻璃仪器烘干器——洗净后的玻璃器皿，

8、如需迅速干燥，可放在烘箱内或玻璃仪器烘干器上烘干。电炉——供加热用。药品柜——供放置药品用。冰箱——用途有多方面，如试剂和母液的保存，试验材料的冷处理，种子和种质材料的冰冻贮藏等。大、小水槽——供洗涤玻璃器皿用。晾干架——供放置玻璃器皿用。废污物桶——供暂时放置废弃物、污物用。搅拌器、酸度计、恒温水浴锅、封口膜、罐装机、记号笔、啪啦膜6.常用的灭菌方法有哪几种？干热灭菌法、湿热灭菌法、熏蒸灭菌、过滤灭菌、药剂灭菌、烧灼灭菌、照射灭菌7.培养基的主要成分及作用。1）水，