最新植物组织培养学习资料.doc

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1、1.植物组织培养（离体培养）：是指在无菌条件下，将植物体的任何一部分，培养在人工配制的培养基上，并给予合适的培养条件，使之发育形成完整植物体的过程。2、植物组织培养的类型（1）根据培养基的类型分为:固体培养液体培养半液半固体培养（2）根据培养材料（外植体类型）分为：植株培养器官培养组织培养原生质体培养胚胎培养细胞培养（3）按培养过程分：初代培养继代培养生根培养3、植物组织培养的一般工作流程1.准备阶段：（1）查阅资料，制定培养方案；（2）清洗组培用器皿、工具；（3）配制所需试剂和培养基；（4）试剂、培养基及器皿、工具的灭菌。2.外植体的选择与消毒；3.初代培养；4

2、.继代培养；5.生根培养；6.炼苗移栽4、植物细胞的全能性概念：指植物体的每个活细胞都携带有该物种的全套遗传信息，在适宜条件下，离体细胞都具有发育为一个完整植株的潜在能力。注意：（1）活细胞（2）离体细胞（3）细胞全能性表达的难易程度取决于细胞的分化程度5、细胞全能性的强弱表现：（1）植物细胞全能性根据细胞的性质不同由强到弱：营养生长中心＞形成层＞薄壁细胞＞厚壁细胞（木质化细胞）＞特化细胞（导管等）（2）植物细胞全能性根据所处的组织不同由强到弱：顶端分生组织＞侧生分生组织＞居间分生组织＞薄壁组织＞厚角组织＞输导组织＞厚壁组织6、植物组织培养中全能性表达的条件：1.

3、无菌条件；2.离体条件；3.一定的营养物质；4.植物生长调节物质；5.适宜的外界条件。7、胚性细胞的特点：未分化状态；细胞具有旺盛分裂能力；具有两极性8、脱分化：指在一定条件下，已分化成熟的细胞、组织或器官恢复到未分化的分生状态，并进行细胞分裂形成未分化的细胞团，如愈伤组织的形成过程。9、愈伤组织形成的三个时期：（1）诱导期又称启动期（最难）。（2）分裂期（3）分化期10、优良愈伤组织的特征：（1）具有旺盛的增殖能力；（2）容易散碎；（3）具有高度的胚性或再分化能力，便于植株再生；（4）经过长期的继代保存而不丧失胚性。11、再分化：指一定条件下，脱分化的细胞或组织

4、转变为具有一定结构、执行一定功能的细胞团和组织，并进一步形成完整植株的过程，即由愈伤组织再生形成完整植株的过程。12、植物形态建成的途径——全能性的实现途径——植物分化成苗的类型（1）器官发生型（2）胚状体发生型（3）原球茎发生型（4）芽再生型13、高压蒸汽灭菌锅——湿热灭菌灭菌要求：0.105MPa的压力下，锅内温度达121℃，保持20~30min干热灭菌：要求：160~170℃，1~2h，如有玻璃器皿则必须待温度降至50℃时，才能打开烘箱门，以防温度骤降玻璃破碎。过滤灭菌：细菌过滤器、注射器，适用于高温高压下易分解的试剂，主要是植物生长调节物质，如IAA、GA

5、3、ZT的灭菌。14、培养基成分（1）.大量元素：包括：N、P、K、Ca、Mg、S、Cl等。（2）微量元素：包括Fe，B，Mn，Cu，Zn，Mo，Co等。15、植物生长调节剂：（1）生长素类：常用吲哚乙酸（IAA）、吲哚丁酸（IBA）、萘乙酸（NAA）、2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）（2）组培中的作用：①促进细胞伸长；②促进生根；③诱导愈伤组织的形成；④2,4-D会诱导某些植物不定胚的形成。（3）作用的强弱顺序：2,4-D＞NAA＞IBA＞IAA（4）需注意的问题：①IAA稳定性差——过滤灭菌，避光保存；②生长素与细胞分裂素（CTK）配合使用：IAA/CTK比

6、值高，促进根的分化；IAA/CTK比值低，促进芽的分化；IAA/CTK比值适中，形成愈伤组织，不分化③2,4-D可有效诱导愈伤组织的形成，但对芽的形成具有抑制作用，且使用浓度范围较窄，稍过量对植物组织有毒害作用；④诱导分化、增殖和生根阶段一般选用IBA和NAA16、细胞分裂素（CTK）：（1）作用：①促进细胞分裂；②诱导胚状体和不定芽的分化；③抑制顶端优势，促进侧芽萌发生长，延缓离体组织衰老；④对根的生长一般起抑制作用（2）常用的细胞分裂素：6-苄基腺嘌呤（6-BA）、激动素（KT）、玉米素（ZT）等。（3）使用浓度：一般0.1~10.0mg/L17、培养基的类型

7、及特点高盐培养基：（1）特点：无机盐含量较高，尤其是硝酸盐、铵盐、钾盐含量较高；元素平衡好，缓冲性好；微量元素和有机物质含量齐全丰富；（2）种类：MS、LS、BL、BM、ER等低盐培养基：（1）特点：无机盐含量特别低，约为MS培养基的1/4，有机物含量也低。（2）种类：改良的White、1/4的MS培养基（3）适用范围：生根培养18、计算：欲配制1LMS＋6-BA0.5mg/L+NAA1.0mg/L＋3%蔗糖+0.6%琼脂培养基，已知MS母液已经配制完成，其浓度分别是：大量元素10倍，微量元素200倍，铁盐100倍，有机物500倍，1.0mg/ml6-BA，0.1

8、mg/ml