空气消毒效果鉴定试验

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1、空气消毒效果鉴定试验2.1.3.1目的检测消毒器械或消毒剂对空气中细菌的杀灭和（或）清除作用，以验证其对空气的消毒效果。其他方法对空气的消毒效果，亦可参照本试验的有关原则进行。2.1.3.2试验设备和器材（1）试验菌为白色葡萄球菌8032,其菌悬液的制备方法见2.1.1.2。（2）采样液［用于液体撞击式采样器采样。非化学因子杀菌试验时，用含抗泡沫剂（辛醇或橄榄油）的营养肉汤培养基；消毒剂杀菌试验吋，用含相应中和剂的营养肉汤培养基（同样加入辛醇或橄榄油）］。（3）中和剂（按2.1.1.5方法鉴定合格者）。（4）磷酸盐缓冲液（PB

2、S,0.03mol/L,pH7.2）。（5）血通营养肉汤培养基°（6）普通着养琼脂培养基。消毒剂杀菌试验时，尚需在其中加入相应的中和剂。（7）相邻的一对气雾柜或气雾室，一个用于消毒试验，一个用于试验对照。一对气雾柜或气雾室所处环境（包括温度、湿度、光照、密闭性、和通风条件等）应一致。柜（或室）宜以铝合金和玻璃构建。应安装温度和湿度调节装置以及通风机过滤除菌或其它消毒装置和相应管道，此外，还应开设供喷雾染菌、给消毒剂、采样等的袖套操作和样本传递等窗口。（8）喷雾染菌装置，包括空气压缩机、压力表、气体流量计和气溶胶喷雾器等。喷出细

3、菌气溶胶微粒的直径90%以上应在lPm〜lOum之间。（9）空气微生物采样装置，包括六级筛孔空气撞击式采样器、液体撞击式采样器、抽气设备、气体流量计等。（10）环境监测器材，如温度计、湿度计等。2.1.3.3试验阶段空气消毒试验分为实验室试验、模拟现场试验与现场试验。三个阶段试验的特点见表2-5o2.1.3.4实验室试验与模拟现场试验操作程序（1）取试验菌菌悬液，用无菌脱脂棉过滤后，再用营养肉汤培养基稀释成所需浓度。（2）同时调节两个气雾柜（或室）的温度、相对湿度至试验耍求的温度和相对湿度。⑶将使用的器材一次放入气雾柜（或室）

4、内，将门关闭。此后，一切操作和仪器设备的操纵均在柜（或室）外通过带有密封袖套的窗口或摇控器进行。育•至试验结束，始可将门打开。（4）按设定的压力、气体流量及喷雾时间喷雾染菌。边喷雾染菌，边用风扇搅拌。喷雾染菌完毕，继续搅拌5min,而后静置5min。（5）同时对对照组和试验组气雾柜（或室）分别进行消毒前采样，作为对照组试验开始前和试验组消毒处理前的阳性对照（即污染菌量）。气雾柜（或室）内空气中各阳性对照菌数应达5’10'cfu/m3〜5"106cfu/m3。表2-5各阶段空气消毒试验的特点项目实验室试验模拟现场试验现场试验S的

5、测定最低有效剂量测定最低有效剂S验证实用消毒效果试验柜（室）f柜10i『〜20m3室220n?房间采样器液体撞击式六级筛孔空气撞击式六级筛孔空气撞击式菌株白色葡萄球菌白色葡萄球菌空气屮自然菌试验菌雾粒<10um<10um不定温度20°C〜25°C20°C〜25°C自然条件相对湿度50%〜70%50%〜70%自然条件屮和剂加于采样液屮加于采样培养基中加于采样培养基中对照需有自然消亡对照需有自然消亡对照不需自然消亡对照结果计算杀灭率杀灭率消亡在模拟现场试验时，用六级筛孔空气撞击式采样器采样，采样时，将六级筛孔空气撞击式采样器放在柜

6、室中央1H1高处（采样方法按采样器使用说明书进行）。在实验室试验吋，用液体撞击式采样器采样，采样器置柜内中央处。（6）按产品说明书规定的方法，在试验组气雾柜（或室）内进行消毒。对照组气雾柜室同时作相应（不含消毒剂）处理。（7）作用至规定时间，对试验组和对照气雾柜（或室）按前述方法同时进行采样。继续作用至第二个预定消毒时间，再次按前述方法进行采样。如此按作用吋间分段采样，直至规定的最终作用吋间为止。（8）在实验室试验阶段，用液体撞击式采样器采集的样本，按2.1.1.3所示方法进行活菌培养计数，在37°C培养箱内培养48h,观察最

7、后结果。（9）在模拟现场试验阶段，用六级筛孔空气撞击式采样器采样时，釆样平板直接放入37°C培养箱中培养48h,观察最后结果，计数牛长菌落数。（10）全程试验完毕，对气雾柜（室）表面和空气中残留的细菌做最终消毒后，打开通风机，过滤除菌排风，排除柜（或室）内滞留的污染空气，为下一次试验作好准备。（11）在完成试验组与阳性对照组采样和样本接种后，应将未用的同批培养基、采样液和PBS等（各取1份〜2份），与上述两组样木同时进行培养或接种后培养，作为阴性对照。若阴性对照组有菌生长，说明所用培养基或试剂有污染,试验无效，更换无菌器材重新

8、进行。(12)同一条件试验重复3次，每次均分别计算其杀灭率。3次结果的杀灭率均$99.90%时，可判为消毒合格。杀灭率的计算方法如下：N:空气中细菌的自然消亡率；V；与W分别为对照'乩试验开始前和试验过程中不同吋间的空气含菌量；Kt:消毒处理对空气屮细菌的杀灭率；V。'与X：