冬虫夏草菌种制备与工厂化栽培

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1、冬虫夏草种制备与工厂化背景技术[0002]天然冬虫夏草生长在我国西部与西南省区的岛寒地区，牛:长环境特殊，资源冇限.由于冬虫夏草的医疗和保健所具有的重要价值被国内外认同后，需求量不断增加。但由于犬然资源数虽不多，加上虫卓产区生态坏境严取恶化，以及人为的偷來滥挖，致使野生虫卓资源数量锐减，产屋不断卜•降，供求矛盾日益加剧，造成药仅原料市场供求脱节，价格昂贵。近年，国内冇很多虫草栽培户都住试验栽培冬虫夏草，但由于冬虫夏草牛长的特殊性，许多栽培户都因诸多原I人1栽培失败，即便冇的栽培成功，但也凶生长嵋

2、形，子实体幻小和成活率低等原因，导致栽培成本高,无法实行工厂化大面枳栽培。[0003]木发明旨在通过改变原仃冬虫夏草的小型栽培基础I：,经多年栽培实验，乂一适合工厂化大面积栽堵与野生冬虫夏草相似的工艺方法，由于培养土、菌种、温湿度、円1值、光照等备方面坏境因素与营养更接近野生冬虫夏草生长条件，致使堪育成活率达92%以l-.o发明内容[0004]木发明冬虫夏草繭种制备与工厂化栽培，其主要是采用大然野生冬虫夏草子座经组织分离制备种源，采用2龄的幼蚕做为冬虫夏草堀养呈的寄生，添加适宜冬虫夏草生长所需的

3、各利仃机养分和无机养分，在摸拟野牛冬虫夏草产区的生态环境，即相适应的温度、湿度、光照厦和⑷值的条件下，栽堀和获取与野牛•冬虫夏草形状、药代用物质含呈相似的虫草资源，其口地是为国内外药您川由场提供人T.栽培的屮国冬虫夏草产品"其方法是：[0005]1、培养设备[0006]木发明采川床架式和容器列种栽培方式，这两种栽堀方式都适合在室内和塑料大棚内"室内设仔立体4层床架，长度按室内或大棚的实际1(11枳自定，用5cmX5cm的三角钢焊接成宽1米的框架，床架上层设置若干个长1・4米,宽0・8米的小池床，

4、池床内用压缩板固定，池床四周用木制板条半同定，池床高为14m以便边枢可以取下，方便采收虫草，设置立体4层，每层间隔0・8米。[0007]2、栽培土配制[0008](1)配方，野生冬虫夏草多生长在针阔混交林地I：,上层林有松、杉、抓、槐、榆类树种,下层有灌木层及草本植物，十壤疏松湿汹，土粒较细,円1值在5-7"为了达到与野牛冬虫夏草相适应的生长条件，木发明采用无污染的林地下沙壤土50%•杂木W10%,谷魁10%,杂草粉20%,河沙10%,混合后过筛•清除杂质°[0009](2)灭菌处理：将磷酸二包

5、钾巾0g、硫酸镁60g、氯化却4()g、硫酸锌COg.VB.lOO片，VCLOOM、蔗糖l・5kg、黄粉虫浆3畑、磁化水1000kg,混合搅拌溶解，喷洒在过筛的栽培t上，搅拌均匀，这时土与水比为1:()・6,达到手握成团，略有水珠不滴,土团落地散开即可，PH值7.2,然后，通过UHT杀菌机瞬间0.5秒杀菌消毒,对各种杂歯、摘毒、虫卵杀死率为100%,这样不仅减少了化学药物处理时产生的气化与异味的污染，适应了谓丝的生长，同时灭菌彻底，省时省力，为栽培进度提前了时间。[0010](3)菌种制备[00

6、11]①试管協种：去皮土豆23().薊豹糖2(々、琼脂20,燕麦片10g、水lOOOmi,合拼水煮浓缩500ml后，分别装入长20cm,II径2cm的试管内,装入量为试管长度的1/3,然后用棉球封【I捆扎，放入HOC灭菌罐内,灭创50分钟后，摆放斜面，待凝固后,将野生冬虫夏草子座川酒牯浸泡3秒种再用灭菌水反复冲洗数遍，用灭闲刀片切成短丝状，取少站按种于试管斜面中心段封【I,移入28匸的恒温箱•内，暗光下培养10天,待见到试管培养幕表面出现星芒状白色菌落时•即可进行试管移接•当二次移接菌丝布满试管

7、后,在从屮挑选优质菌种丝进行第三次转管扶壮培养，第三次复壮闲丝成熟后，方可转扩栽培菌•种•由于葡丝的无性繁殖及多次转管和栽培的冬虫夏草菌种，其每本垂因容易发生变异，貝•体表现为子座多畸形、子座綾小,质量和产址下降“因此，在止常栽培中要定期对冬虫良草创种进行一次有性繁殖，即子朋组织分离或抱子分离培养，这样可有效的避免杂葡污染和協种退化。[0012]②液体栽培菌种役备：木发明设计一组三管式简易发酵装置。目前,真菌类工业化大罐发时技术，匸要是以生产约用及保健用山帮菌丝体为n的。但是，I业深层发酵匸程投

8、资大，工序复杂，技术条件要求岛，而且主要是生产药倉用创丝体，一旦灭菌不彻底及杂菌污染，即可造成醴罐发酢液培养失败，这种发醉装程即使在工厂化人面积栽培的惜况下，血不宜采用。针对这种悄况，为了在较短时间内生产岀大量优质供人工栽培用的冬虫夏草液体園种，就必须设计出一种新型发酵装賈，它H有投资少，操作简便，生产周期短，菌丝质量好等优点。本发明设计的是一种三管组合式发酵装置，它改革了工厂化栽培需进购昂贵的大型发酵设备，以及常规培养所用的摇床Z类装胃，只需配备交直两用的小气量通气装置电碰泵、空气过滤器.3(